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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ 至 -80℃
- 保质期:
12个月
- 英文名:
mouse HAT1 qPCR primer pairs
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
反应种属:Mouse
引物靶点:HAT1
引物保存条件:The lyophilized product is stable for one year from date of receipt when stored at -20℃. The suspended product is stable for six months from date of receipt when stored at -20℃.
GeneBank ID:
序列长度:0
引物描述:Verified forward and reverse primers for analyzing the quantitative expression of gene
引物质控信息:The primer mix has been verified to generate satisfactory qPCR data on Roche LightCycler480
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文献和实验qPCR引物设计,Primer3 Plus 和 Primerbank 都能搞定!
,出现结果。颜色代表得分,选择引物的原则是:列表中大部分是目的基因,说明引物特异性高;但是可能物种不同,说明该基因在不同物种中保守。Primerbank哈佛大学的一个 qPCR 引物数据库,目前有超过 20 万条引物,涵盖了人和小鼠大部分已知的基因。根据网站上对两万多对引物的验证结果,引物有效率为 82.7%。尽量选择这种验证过的 qPCR 引物,qPCR 品质比较有保障。网址:http://pga.mgh.harvard.edu/primerbank/搜索类型这里,可以根据 GenBank
今天准备跟大家分享一下 qPCR 引物设计的具体流程。在进行引物设计之前,首先大家都应该了解引物设计需要注意的一些细节与原则,归纳如下:引物设计原则1. 引物应用核酸系列保守区内设计并具有特异性。要设计引物首先要找到 DNA 序列的保守区。同时应预测将要扩增的片段单链是否形成二级结构。如这个区域单链能形成二级结构,就要避开它。如这一段不能形成二级结构,那就可以在这一区域设计引物。2. 产物不能形成二级结构。3. 引物长度一般在 15~30 碱基之间。G+C 含量在 40%~60% 之间
一般来讲,进行real-time qPCR MasterMix都是2×的浓缩液,只需要加入模板和引物就可以。由于real-time qPCR灵敏度高,所以每个样品至少要做3个平行孔,以防在后面的数据分析中,由于Ct相差较多或者SD太大,无法进行统计分析。通常来讲,反应体系的引物终浓度为100-400mM;模板如果是总RNA一般是10ng-500,如果cDNA,通常情况下是1ul或者1ul的10倍稀释液,要根据目的基因的表达丰度进行调整。当然这些都是经验值,在操作过程中,还需要根据所用
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