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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ 至 -80℃
- 保质期:
12个月
- 英文名:
mouse WFDC2 qPCR primer pairs
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
反应种属:Mouse
引物靶点:WFDC2
引物保存条件:The lyophilized product is stable for one year from date of receipt when stored at -20℃. The suspended product is stable for six months from date of receipt when stored at -20℃.
GeneBank ID:
序列长度:0
引物描述:Verified forward and reverse primers for analyzing the quantitative expression of gene
引物质控信息:The primer mix has been verified to generate satisfactory qPCR data on Roche LightCycler480
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文献和实验qPCR引物设计,Primer3 Plus 和 Primerbank 都能搞定!
,上下游引物之间间隔 20 个以上 n。6、选择物种数据库,如 Human,Mouse 或者 Others(如果是非人和非小鼠物种)。7、选择 Somewhat similar sequences(blastn)8、点击 Algorithm parameters, 在 Expect threshold 输入 1000,在 Word Size 输入 7。Word size 不是字体大小的意思,应该理解为读长,按照 7 个一组核苷酸序列放到 GeneBank 中进行比对。9、点击 BLAST,开始比对
今天准备跟大家分享一下 qPCR 引物设计的具体流程。在进行引物设计之前,首先大家都应该了解引物设计需要注意的一些细节与原则,归纳如下:引物设计原则1. 引物应用核酸系列保守区内设计并具有特异性。要设计引物首先要找到 DNA 序列的保守区。同时应预测将要扩增的片段单链是否形成二级结构。如这个区域单链能形成二级结构,就要避开它。如这一段不能形成二级结构,那就可以在这一区域设计引物。2. 产物不能形成二级结构。3. 引物长度一般在 15~30 碱基之间。G+C 含量在 40%~60% 之间
装备很重要:做出心中的梦中情图,最基本的一步就是拥有一把好用的移液枪,保证其量程是准确的,且每次做 RT-qPCR 的时候要固定使用那一把移液枪,避免造成因枪的不同带来的误差。 保证 RNA 质量:A260/A280要在 2 左右;不同组的样品 cDNA 的浓度也要一致,只有这样你所要扩增的模板的基线才是一致的,后续出来的 CT 值才有参考意义。 反复确认引物种属:很多刚接触实验的小白们,拿着 human 的引物在鼠样本上做 RT-qPCR,,也许跑到天荒地老这个结果也无法得到,既浪费
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