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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原:
A DNA sequence encoding the human PTPN2 ( P17706-1) (Met 1-Asn 314) was expressed and purified with two additional amino acids (Gly & Pro ) at the N-terminus.
- 亚型:
见说明书
- 形态:
液体
- 保存条件:
4℃
- 克隆性:
无
- 标记物:
见说明书
- 适应物种:
Human
- 保质期:
12个月
- 抗原来源:
见说明书
- 目录编号:
10570-HNCBL
- 级别:
免疫学
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 宿主:
Baculovirus-Insect cells
- 应用范围:
WB
- 浓度:
见说明书
- 靶点:
PTPN2
- 抗体英文名:
Human PTPN2 / PTPT Insect Cell Lysate (WB positive control)
- 抗体名:
Human PTPN2 / PTPT Insect Cell Lysate (WB positive control)
- 规格:
300 µg
反应种属:Human
裂解液靶点:PTPN2
裂解液应用:WB
裂解液保存条件:Store at 4℃. After re-dissolution, aliquot and store at -80℃.
裂解液产品描述:Baculovirus-Insect Cell lysate that Human PTPN2 / PTPT transfected / overexpressed for Western blot (WB) positive control. The whole cell lysate is provided in 1X Sample Buffer (1X modified RIPA buffer+1X SDS loading buffer).
裂解液表达宿主:Baculovirus-Insect cells
裂解液制备方法:Cell lysate was prepared by homogenization of the over-expressed cells in ice-cold modified RIPA Lysis Buffer with cocktail of protease inhibitors (Sigma). Cell debris was removed by centrifugation. Protein concentration was determined by Bradford assay (Bio-Rad protein assay, Microplate Standard assay). The cell lysate was boiled for 5 min in 1 x SDS loading buffer (50 mM Tris-HCl pH 6.8, 12.5% glycerol, 1% sodium dodecylsulfate, 0.01% bromophenol blue) containing 5% b-mercaptoethanol, and lyophilized.
裂解液Buffer:Modified RIPA Lysis Buffer: 50 mM Tris-HCl pH 7.4, 150 mM NaCl, 1mM EDTA, 1% Triton X-100, 0.1% SDS, 1% Sodium deoxycholate, 1mM PMSF.
裂解液质控信息:12.5% SDS-PAGE Stained with Coomassie Blue after protein purification.
裂解液使用建议:1. Centrifuge the tube for a few seconds and ensure the pellet at the bottom of the tube. 2. Re-dissolve the pellet using 200μL pure water and boil for 2-5 min.
裂解液稳定性:Samples are stable for up to twelve months from date of receipt.
裂解液使用说明:Western blot (WB): Use at an assay dependent dilution. Other Applications: Not tested. Optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
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文献和实验文献了解是否可以有条件的诱导目的蛋白的表达,以助于 WB 实验的检测。例如,XPC 蛋白主要表达于细胞核上,在 U87 细胞中表达量远低于 Hela 细胞(抗体说明中的阳性对照),查阅文献后得知 TMZ 诱导可以显著促进 XPC 入核[6]。因此,可以使用 TMZ 诱导 2 周后再开展后续实验。 图 2. XPC 在不同细胞中表达情况 (图片来源:The human protein atlas) 四、小结 除去抗体及操作失误等因素,当出现
北京义翘神州生物技术有限公司(Sino Biological Inc.)--致力于为全球生命科学研究人员提供高质量的重组蛋白、抗体等科研工具试剂。 • 国际一流的团队:4名中央"千人计划",300人科研团队 • 一流的技术平台:蛋白表达大规模生产,鼠单抗与兔单抗技术 • 国内最大蛋白、抗体库:2000多种蛋白,1500多种抗体 • 抗体检测限比国际知名品牌抗体低10~160倍 • 3000多家全球客户:哈佛医学院、斯坦
3、因为你做的是表达克隆,所以还必须做WB验证,需要购买抗体和WB试剂,这是另一笔费用。如果蛋白表达了,还要看蛋白定位、活性等等,又是一笔费用。 4、基因克隆虽不像初学者所说的那么难,但也不是像半瓶子水的研究者认为的那么简单,根据我的经验,两类基因的克隆有点难度:低丰度的基因难克隆;分子量大的难克隆(尤其是100KD以上,这时其ORF超过3000bp,做高保真PCR有难度。注:基金申请中,有时看到申请者人无意识的选做的恰就是大分子量蛋白,可谓不知者者无畏)。 5、但事实
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