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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原:
A DNA sequence encoding the mouse IL2RA (NP_032393.3) (Met1-Lys236) was expressed with the Fc region of human IgG1 at the C-terminus.
- 亚型:
见说明书
- 形态:
液体
- 保存条件:
4℃
- 克隆性:
无
- 标记物:
见说明书
- 适应物种:
Mouse
- 保质期:
12个月
- 抗原来源:
见说明书
- 目录编号:
50292-M02HL
- 级别:
免疫学
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 宿主:
HEK293 Cells
- 应用范围:
WB
- 浓度:
见说明书
- 靶点:
IL2RA
- 抗体英文名:
Mouse CD25 / IL2RA CHO Cell Lysate (WB positive control)
- 抗体名:
Mouse CD25 / IL2RA CHO Cell Lysate (WB positive control)
- 规格:
300 µg
反应种属:Mouse
裂解液靶点:IL2RA
裂解液应用:WB
裂解液保存条件:Store at 4℃. After re-dissolution, aliquot and store at -80℃.
裂解液产品描述:HEK293 Cell Mouse CD25 / IL2RA transfected / overexpressed for Western blot (WB) positive control. The whole cell lysate is provided in 1X Sample Buffer (1X modified RIPA buffer+1X SDS loading buffer).
裂解液表达宿主:HEK293 Cells
裂解液制备方法:Cell lysate was prepared by homogenization in ice-cold modified RIPA Lysis Buffer with cocktail of protease inhibitors (Sigma). Cell debris was removed by centrifugation. Protein concentration was determined by Bradford assay (Bio-Rad protein assay, Microplate Standard assay). The cell lysate was boiled for 5 min in 1 x SDS loading buffer (50 mM Tris-HCl pH 6.8, 12.5% glycerol, 1% sodium dodecylsulfate, 0.01% bromophenol blue) containing 5% b-mercaptoethanol, and lyophilized.
裂解液Buffer:Modified RIPA Lysis Buffer: 50 mM Tris-HCl pH 7.4, 150 mM NaCl, 1mM EDTA, 1% Triton X-100, 0.1% SDS, 1% Sodium deoxycholate, 1mM PMSF.
裂解液质控信息:12.5% SDS-PAGE Stained with Coomassie Blue after protein purification.
裂解液使用建议:1. Centrifuge the tube for a few seconds and ensure the pellet at the bottom of the tube. 2. Re-dissolve the pellet using 200μL pure water and boil for 2-5 min. 3. Store the lyophilized cell lysate at 4℃. After re-dissolution, recommend to aliquot it into smaller quantities and store at -80℃.
裂解液稳定性:Samples are stable for up to twelve months from date of receipt.
裂解液使用说明:Western blot (WB): Use at an assay dependent dilution. Other Applications: Not tested.
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文献和实验结果,将NC膜晾干扫描保存。反应溶液可预先配置,可在4℃储存一年以上。 三、说明 1. WB对照系统 阳性对照:最好有标准品,或阳性血清、阳性上清。 阴性对照:测血时用相应小鼠未免疫血清,测培养上清,用无克隆培养上清。 空白对照:不加一抗,用1%BSA代替。 无关对照(替代对照):用无关项目一抗,或无关项目的抗体。 2.切割膜时,大小一般为3-5mm,一抗的体积为每条膜保证1ml。 3.KSHV、MCMV
的,但是这结果是不是假阳性呢?还得做个阴性对照。阴性对照如何设置呢?考虑到整个实验体系会出现 beads、抗X抗体、诱饵蛋白 X、靶蛋白 Y(co-IP): 可能出现的假阳性来源 需要的阴性对照 抗 X 抗体结合非特异的蛋白 与 IP 一抗种属亚型相同的免疫球蛋白(比如,抗 X 抗体是 Mouse IgG,阴性对照可使用 Mouse 免疫球蛋白) beads 对蛋白的非特异结合* 同上,此外还可进行 Pre clear,IP 正式实验前排除非特异结合蛋白。如果使用琼脂
-mouse IgG,分别用5%脱脂奶粉PBST溶液(图A)和Solution 2(图B)按照1:10,000比例稀释。 检测:化学发光法(曝光30秒)。 2、非特异性条带过多--SignalBoostTM可以有效降低背景: 样品:全细胞裂解液。 一抗:anti-ERK1的抗体,分别用5%脱脂奶粉PBST溶液(图A)和Solution 1(图B)按照1:200比例稀释。 二抗:分别用5%脱脂奶粉PBST溶液(图A)和Solution 2(图B)按照1:3000比例稀释,室温1小时。 检测
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