- ￥2550
- Sino Biological
- 北京
- VG40297-ACGLN
- 2025年08月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃ to -80℃
- 保质期：
3个月
- 英文名：
Plasmodium falciparum (strain 3D7) FAS2 Gene Lentiviral ORF cDNA expression plasmid, C-GFPSpark tag(Codon Optimized)
- 库存：
99
- 供应商：
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格：
1 Unit
基因靶点：FAS2
反应种属：P. falciparum
应用说明：
cDNA描述：Full length Clone DNA of Plasmodium falciparum (strain 3D7) falcipain-2'.
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文献和实验作为细胞生物学专业的博士生，在基因功能研究上已经有五年的经验了，今天我给大家讲讲其中经常用到并且非常重要的一种技术--慢病毒包装的过表达体系。下面我就从引物设计，慢病毒表达质粒构建等方面详细讲述。下面以 plex-MCS 载体为例。1. 选择酶切位点，为了避免移码突变，上游的酶切位点选择起始密码子 ATG 前面的 spel，下游选择 xho1。2. 构建方法的选择。连接法对于连接法，首先设计引物将目的基因 PCR 出来，即酶切位点加基因引物，此时应注意，为了防止酶切将基因破坏，通常习惯在两端
的表达水平60%以上的病毒。 «包装好一个产品的周期大概需要多久呢? 一般而言载体构建及准备需要10-15个工作日，病毒包装及扩增需要20-30个工作日，滴度测定需要5-10个工作日，总计需要35-55个工作日。 «利用慢病毒载体的优势在于? (1)对于一些较难转染的细胞，如原代细胞、干细胞、不分化的细胞等,慢病毒能大大提高目的基因转导效率，而且目的基因整合到宿主细胞基因组的几率大大增加，这就为RNAi，cDNA 克隆以及报告基因的研究提供了一个有利
RNA前体，具有表达GFP标签可以方便地进行表达追踪和可以同时表达多个miRNA的优点。在转染 效率大于80%的前提下，英茂盛业对单个基因设计3条RNA干扰序列，可以保证至少1条可以达到干扰效率70%以上。 2)pRI-H1 shRNA干扰载体——H1启动子启动的shRNA干扰载体系列。包括带或者不带GFP荧光标签、Neomycin或Hygromycin抗性基因以及可诱导的TetOn载体可供选择。 2、RNAi转染优化 ——包括siRNA导入优化和质粒 转染优化
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