- ￥2370
- Sino Biological
- 北京
- VG40535-CF
- 2025年08月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃ to -80℃
- 保质期：
3个月
- 英文名：
Coxsackievirus A16 P1 Gene ORF cDNA clone expression plasmid, C-Flag tag
- 库存：
99
- 供应商：
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格：
1 Unit
基因靶点：CAV-VP1
反应种属：CV
应用说明：Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述：Full length Clone DNA of Coxsackievirus A16 (CAV 16,strain G-10) P1 with C terminal Flag tag.
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文献和实验作为细胞生物学专业的博士生，在基因功能研究上已经有五年的经验了，今天我给大家讲讲其中经常用到并且非常重要的一种技术--慢病毒包装的过表达体系。下面我就从引物设计，慢病毒表达质粒构建等方面详细讲述。下面以 plex-MCS 载体为例。1. 选择酶切位点，为了避免移码突变，上游的酶切位点选择起始密码子 ATG 前面的 spel，下游选择 xho1。2. 构建方法的选择。连接法对于连接法，首先设计引物将目的基因 PCR 出来，即酶切位点加基因引物，此时应注意，为了防止酶切将基因破坏，通常习惯在两端
-16、pQE-40，使生成目标多肽与DHFR的融合蛋白；如果是纯化过程中蛋白易降解，则可以在纯化试剂中加入甘油以及蛋白酶抑制剂，并且确保整个操作在4度完成。 2、如何在E. coli中表达高度毒性的蛋白？ 在E. coli中表达高度毒性的蛋白往往是很困难的。毒性基因表达‘泄漏’会杀死宿主菌，尤其在早期的生长或转化后，可以使含有突变的不表达质粒的细菌选择性生 长。因此，要表达高毒性的蛋白，需要更高水平的lac 抑制蛋白。推荐同时使用QIAGEN公司的pQE-80L系列表达载体和M15
聚合酶识别）和两个乳糖操纵子识别序列，以保证与乳糖抑制子的结合从而抑制T5启动子的表达。合成的核糖体结合位点RBSⅡ，保证高效的翻译在克隆区域的5'或者3'含有6×组氨酸标签有多个终止密码子，无论你的片段从多克隆位点的哪里插入都可以正确的终止。两个强而有利的转录终止子：来自λ噬菌体的t0和来自大肠杆菌rrnB操纵元的T1，可以有效预防转录中的通读现象并保证表达质粒的稳定性。所有质粒含有β- 内酰胺酶（bla）基因，因此氨苄霉素抗性，在t0和T1间插入有氯霉素乙酰化转移酶基因
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