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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
Rat MANF Gene Lentiviral ORF cDNA expression plasmid, C-GFPSpark tag
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:MANF
反应种属:Rat
应用说明:
cDNA描述:Full length Clone DNA of Rattus norvegicus mesencephalic astrocyte-derived neurotrophic factor
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文献和实验作为细胞生物学专业的博士生,在基因功能研究上已经有五年的经验了,今天我给大家讲讲其中经常用到并且非常重要的一种技术--慢病毒包装的过表达体系。下面我就从引物设计,慢病毒表达质粒构建等方面详细讲述。下面以 plex-MCS 载体为例。1. 选择酶切位点,为了避免移码突变,上游的酶切位点选择起始密码子 ATG 前面的 spel,下游选择 xho1。2. 构建方法的选择。连接法对于连接法,首先设计引物将目的基因 PCR 出来,即酶切位点加基因引物,此时应注意,为了防止酶切将基因破坏,通常习惯在两端
lf2003128245 本人手上有个慢病毒的质粒,目的基因是通过SalI酶切位点插入的,我想将这个基因切下来重新构建,希望有经验的大侠能够指点,可以选择些什么样的质粒呀,最好是带有GFP标记的非病毒质粒,还有个问题请教就是,病毒载体是不是不需要类似于G418筛选的标记呀?如果我找到个质粒,将这个基因连上去之后,怎么才能鉴别/筛选目的基因正反向的问题?谢谢了! fjxie 目的基因是通过SalI酶切位点插入的,我想将这个基因
. 2019 Aug 6. doi: 10.1038/s41380-019-0472-7.体外应用时,慢病毒载体能够有效地感染培养的神经元、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型原代细胞和大部分细胞系。由于慢病毒的感染具有整合特性,其能够将外源基因有效地整合到宿主染色体上,因而可以达到持久性表达,从而构建稳转细胞株,用于基因的细胞功能研究。慢病毒载体感染大鼠原代神经元,5uL 病毒量(滴度:1.2E+8 TU/mL)病毒转染 48h 后观察 GFP 表达。图片来源:Curr Protoc
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