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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
Mouse Fetuin A Gene ORF cDNA clone expression plasmid, C-Flag tag
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:AHSG
反应种属:Mouse
应用说明:Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述:Full length Clone DNA of Mouse alpha-2-HS-glycoprotein with C terminal Flag tag.
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文献和实验沉淀(Immunoprecipitation)等实验中经常用到,因为有非常特异的HA、Flag抗体。Biotin可以跟生物素(Streptavidin)直接结合并用于免疫沉淀。在模式小鼠中,这些标签多肽或蛋白可以与要研究的蛋白做成融合蛋白。这种模式小鼠最常被用到的是Chip-chip实验。比如要研究一个转录因子的功能,就需要知道这个转录因子在细胞内(正常或刺激条件下)结合到染色体基因组DNA的位置以及结合序列。我们知道,特异性好、亲和力高的抗转录因子的抗体非常不容易得到或制备。这个时候可以将标签多肽(比如FLAG)放在转录
会怎样"用 CRISPRa。 --- 一、机制差异决定了两者能回答的问题不同 过表达质粒(cDNA / ORF) 外源启动子(CMV、EF1α 等)驱动,表达量与内源调控完全脱钩; 通常只包含单一 CDS,不含内含子和 UTR; 表达量可达到内源的几十到几百倍; 可携带标签(FLAG、HA、GFP)方便检测。 CRISPRa(dCas9-VP64 / VPR / SAM / SunTag) 失活 Cas9(dCas9)融合转录激活域,被 gRNA 引导至靶基因启动子区; 激活的是内源位点,转录本包含完整的内含
流程在体系内有标准操作; 文库筛选:全基因质粒文库、CRISPR SAM 文库等文库病毒支持高通量功能筛选; CRISPRa/SAM:内源基因激活方向(Lenti-Cas9-SAM)的过表达替代方案。 --- 六、这些案例对课题规划的实际价值 读吉凯客户文献的正确姿势,是提取参数而不是只看结论: MOI 与感染条件:各细胞类型的 MOI 参考、增强液配比、换液时间——直接进入自己的预实验设计; 载体设计参照:启动子、标签(Flag/Myc/HA)、荧光、抗性的组合方式,以及基因表达检测的验证链
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