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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Mouse BCAT1 Gene ORF cDNA clone expression plasmid
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:BCAT1
反应种属:Mouse
应用说明:Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述:Full length Clone DNA of Mouse branched chain aminotransferase 1, cytosolic.
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文献和实验双链短RNA(dsRNA)阻断基因表达机理及双链RNA的构建
细胞内,它抑制靶基因的作用并没有受到影响。因而研究者推测,哺乳动物细胞内不存在象线虫那样的依赖于RDRP的RNAi放大机制。在哺乳动物细胞中瞬时转染dsRNA后,dsRNA的作用只维持了三天。而将表达dsRNA的载体转入哺乳动物细胞后筛选出的稳定表达株中,在转染八周后dsRNA仍能有效的抑制靶基因的表达[9]。利用载体表达出的dsRNA为发夹结构,其环状部位的核苷酸的序列和数目对dsRNA的作用都有影响,研究者发现9个核苷酸比5个或7个核苷酸的效果好[9]。DsRNA的作用很强,在1nM时就能有效的阻断
细胞中的RNAi 在小鼠的胚胎细胞中也存在RNAi,将727个碱基对的双链RNA转入小鼠的畸胎瘤细胞,诱发了细胞内的RNAi机制,并抑制了报告基因的表达。但大于30个核苷酸的双链RNA进入哺乳动物的成体细胞后,会非特异的阻断基因的表达。这是由于当长的双链RNA进入哺乳动物成体细胞后,细胞内的病毒防御机制被激活。细胞内干扰素产生增加,蛋白激酶PKR激活,使转录因子E2F被抑制,非特异的阻断基因的转录,并诱导细胞凋亡。另一方面,RNA酶L(RNase L)被激活,产生非特异的mRNA降解。而未分
siRNA的成本. 此外,带有抗生素标记的siRNA表达载体可用于长期抑制研究,通过抗性辅助筛选,该质粒可以在细胞中持续抑制靶基因的表达数星期甚至更久.同时RNAi-Ready表达载体还能与逆转录病毒和腺病毒表达系统整合(BD Knockout RNAi Systems),大大提高siRNA表达载体对宿主细胞的侵染性,彻底克服某些细胞转染效率低的障碍,是实现哺乳动物细胞siRNAs瞬时表达与稳定表 达的理想工具. 4、合成模板 合成编码 shRNA的DNA 模板的两条单链
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