Sino Biological 人骨钙素基因ORF cDNA克隆表达质粒 全长克隆 骨细胞dna克隆

DNA的克隆

mRNA逆转录合成的双链cDNA分子。由于基因组DNA较大，不利于克隆，因此有必要将其处理成适合克隆的DNA小片段，常用的方法有机械切割和核酸限制性内切酶消化。若是基因序列已知而且比较小就可用人工化学直接合成。如果基因的两端部分序列已知，根据已知序列设计引物，从基因组DNA 或cDNA中通过PCR技术可以获得目的基因。二 载体的选择基因工程的载体应具有一些基本的性质：1）在宿主细胞中有独立的复制和表达的能力，这样才能使外源重组的DNA片段得以扩增。2）分子量尽可能小，以利于在宿主细胞中有较多的拷贝

生物芯片在药物靶点发现与药物作用机制研究中的应用

的结果。若基因表达的变化是病变的原因，则以此基因为靶点的药物就可能逆转病变；若基因表达的变化是病变的结果，则以此基因为靶点的药物就可能减轻病变的症状。DNA芯片技术可以在病理组织与正常组织之间一次比较成千上万个基因的表达变化，找出病理组织中表达异常的基因。Heller等提取正常及诱发病变的巨噬细胞、软骨细胞系、原代软骨细胞和滑膜细胞的 mRNA，用包含细胞因子、趋化因子、DNA结合蛋白及基质降解金属蛋白酶等几大类基因的cDNA芯片进行筛选，发现了数种变化明显的基因。其中除了有已知与类风

那位老师能帮我详细解这些题？方法？步骤

液配制 成10 mM的溶液？ 3. 下图是一个质粒图谱，请标明其主要构件的作用。请问若用该质粒转染哺乳动物细胞，它能在染色体外独立复制吗？为什么？ 4. 许多克隆型载体含有决定蓝白菌落筛选的DNA元件，其工作原理如何？ 5. A G T C 下图是一张DNA测序胶片结果，请从5’写出合成链的DNA序列。 6. 你克隆了一个新基因，并已知是一种膜蛋白，且根据cDNA序列制备了其单克隆抗体。请问如何利用该抗体确定体内该蛋白质的分 子量？若测出的分子量大于根据cNDA推测