- ￥1770
- Sino Biological
- 北京
- HG29365-UT
- 2025年08月12日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃ to -80℃
- 保质期：
3个月
- 英文名：
Human KRTAP21-3 Gene ORF cDNA clone expression plasmid
- 库存：
99
- 供应商：
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格：
1 Unit
基因靶点：KRTAP21-3
反应种属：Human
应用说明：Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述：Full length Clone DNA of Human keratin associated protein 21-3
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文献和实验三句话读懂一篇 CNS，酗酒背后的机制，环境-基因互作诱导肿瘤发生，Cas9 时钟...
事件和时间 2021 年 2 月 3 日，韩国延世大学 Hyongbum Henry Kim 教授团队在 Cell 上发表研究论文 Recording of elapsed time and temporal information about biological events using Cas9。该工作在哺乳动物细胞引入 CRISPR-Cas 系统，其产生的插入缺失等突变以稳定的速率累积。CRISPR-Cas 系统利用上述特点热刺激激活、结合药物激活和炎症反应激活，能够记录药物的累积时间，同时确定
质粒，因此细胞间会存在差异。总的来说，稳定转染的细胞只含有1-2个被整合的质粒。因此，稳定转染细胞的荧光表达量会低于瞬时转染的细胞； 2） 确定细胞转染48小时后或是新霉素筛选前才长满。因为生长接触抑制会降低目的基因的表达； 3）确定细胞在转染后48小时以及药物筛选过程中生长状态良好。如果在瞬时表达阶段细胞不健康，可能是提示有潜在的毒性； 4）做G418杀伤曲线。如果筛选用的药物太浓（不同批号间的药物浓度可能不同），选择压力过强。报告基因的表达水平与筛选抗性基因的不完全正相关，细胞在过高
从新鲜的培养基上挑选单克隆，少量培养后，2000倍稀释大量培养。 含有疏水基团的重组蛋白往往对宿主菌有毒性。因此，除非有特殊的意义，应当去除插入片段中编码信号肽序列或穿膜区的序列。然而，也有少数包含信号肽的蛋白可以在膜间质少量的表达。这种情况下，建议诱导前培养温度降低为25度。 有些蛋白，尤其是小于10KDa的蛋白在E. coli中不稳定，可能很快被细菌中的蛋白酶降解。克服这种困难的方法包括：降低培养温度到30度；使用一种或多种蛋白酶缺陷的宿主菌；使用QIAGEN公司的表达质粒pQE
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