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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
Human ZNF729 Gene ORF cDNA clone expression plasmid
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:ZNF729
反应种属:Human
应用说明:Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述:Full length Clone DNA of Human zinc finger protein 729
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文献和实验方法还是占主要地位,尤其是新兴的方法如果要做 gain-of-function 仍然逃避不了克隆 gene 片段这个步骤,打好相关的基础,掌握其中原理才能在各种 tools 出现时及时掌握并灵活应用。接下来讲述基因克隆的流程1 首先获得某基因的序列在 pubmed 主页下拉框选定 Gene 或者 Nucleotide,然后在输入框输入基因名称如 Znf516 点击 search 后,进入(如图 1)。在左边分类 Sequence content 里选择 CCDS(如图 2),在右侧选择种属 Mus
的不稳定,导致克隆DNA部分的缺失或重排。为克服上述缺点,人们采用低拷贝数复制子载体,如,E coli中的F因子。此质粒含有2种基因(part A, part B)。每个E coli能接受 >300kbDNA片段。 2、噬菌体PI载体和PAC PI噬菌体与λ噬菌体一样,外有蛋白质壳。内含相当大的(110~115kb)线性DNA,并在体外包装于PI壳内。PI进入宿主细胞后环化,扩增。 1994年,有人将PI和F因子克隆结合产生PI人工染色体克隆系统-----PAC。 3、酵母人工染色
以上,这时其ORF超过3000bp,做高保真PCR有难度。注:基金申请中,有时看到申请者人无意识的选做的恰就是大分子量蛋白,可谓不知者者无畏)。 5、但事实上真正的困难还是在于基因的外源表达和功能/活性等后续检测。 所以,建议你先做基因表达检测,然后选择性的再做基因克隆表达。 首先非常感谢这么细致的回复。 我想知道,基因克隆到绿色阳光蛋白载体中,转染细胞后,是否在细胞中看到绿色荧光蛋白就可以认为目的蛋白表达了,还需要进行抗体
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