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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
Human TCF24 Gene ORF cDNA clone expression plasmid
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:TCF24
反应种属:Human
应用说明:Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述:Full length Clone DNA of Human transcription factor 24
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文献和实验提取总RNA,RT-PCR检测目的基因的表达 ②western检测目的基因。 注意:转染时压系时细胞不能铺的太满,不然当细胞连接紧密后,压系时不具G418抗性的细胞死亡时极易将具有抗性的细胞一起从壁上脱落下来。
,将产物全部加入60mm的dish中,轻轻摇动dish以混匀。 9、37℃,5%CO2培养,在细胞汇合度不超过50%时加入G418进行筛选。 转染时转染两组细胞,组一在转染后细胞汇合度不超过50%时(一般是24小时)加入G418进行筛选;组二在转染后待细胞汇合度达到80%时1/4000、1/1000、1/300分别接种于dish中,48小时后加G418筛选。 10、加入G418后,每3天更换一次含有筛选浓度的G418。当有大量细胞死亡(5-7天)时,可以把G418的浓度减半维持筛选(此时可以加入
③虽然经过多年努力,哺乳动物细胞表达系统的表达水平有大幅度增高,但从整个水平上看仍偏低,一般处在杂交瘤细胞单克隆抗体蛋白产率的下限,即1-30μg/l08细胞/24小时。有人认为其限速步骤可嚣是在工程细胞中(对于重组蛋白来讲,常是异源的),重组蛋白的分泌效率较低。 1 表达载体 1.1 表达栽体的类型 哺乳动物细胞表达外源重组蛋白可利用质粒转染和病毒载体的感染。利用质粒转染获得稳定的转染细胞需几周甚至几个月时间,而利用病毒表达系统则可快速感染细胞,在几天内使外源基因
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