Sino Biological Human OR5B2基因ORF cDNA克隆表达质粒 Human种属 稳定或瞬时哺乳动物表达

载体做共转染（瞬时转染）时的复制起点\启动子问题

分配系统，彼此之间存在竞争，经过几代分裂后，最初在随即分配中产生的微小差别，最终可导致一种质粒消失这是我从书上摘下来的，虽然书上说的是“不能共存于同一宿主菌中”，个人以为在哺鲁动物细胞中也不能共存。不知对不对，大家讨论一下丁香园网友marinayang：与楼上探讨：瞬时转染中应该不存在这个问题，质粒的不相容性是随着复制的进行而进行的随机选择性稀释现象，要经过好几次分配才有可能表现出最后的不相容现象。而且此机制需要原核细胞表达系统的辅助。而在瞬时转染后，哺乳动物细胞继续培养的时间一般都不会超过48个小时，因而这种

载体做共转染时的复制起点\启动子问题

次分配才有可能表现出最后的不相容现象。而且此机制需要原核细胞表达系统的辅助。而在瞬时转染后，哺乳动物细胞继续培养的时间一般都不会超过48个小时，因而这种机制不会起很大作用。 与楼主： 共转只是为了检验你的质粒是否纯净，操作手法是否规范合格。也就是说是一个阳性标志物。令外，共转的两种质粒混合均匀以后，其转进去的比例是不会变的，这是一个概率问题。

【求助】差异基因表达的分析方法：哪种比较好？

以上，这时其ORF超过3000bp，做高保真PCR有难度。注：基金申请中，有时看到申请者人无意识的选做的恰就是大分子量蛋白，可谓不知者者无畏）。 5、但事实上真正的困难还是在于基因的外源表达和功能/活性等后续检测。 所以，建议你先做基因表达检测，然后选择性的再做基因克隆表达。 首先非常感谢这么细致的回复。 我想知道，基因克隆到绿色阳光蛋白载体中，转染细胞后，是否在细胞中看到绿色荧光蛋白就可以认为目的蛋白表达了，还需要进行抗体