- ￥1770
- Sino Biological
- 北京
- HG27921-UT
- 2025年08月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃ to -80℃
- 保质期：
3个月
- 英文名：
Human SMIM21 Gene ORF cDNA clone expression plasmid
- 库存：
99
- 供应商：
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格：
1 Unit
基因靶点：SMIM21
反应种属：Human
应用说明：Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述：Full length Clone DNA of Human small integral membrane protein 21
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文献和实验一，酵母表达系统毕赤酵母表达系统（invitrogen公司）：分泌型质粒pPIC9K，宿主菌毕赤酵母GS115分泌型质粒pPICZalpha （甲醇诱导）宿主菌毕赤酵母x33分泌型质粒pHIL-S1二，原核表达质粒表达宿主菌为BL21(DE3)系列带His标签（N端）：PET5-(a)氨苄抗性带His标签（N端）：PET28-(a)卡那抗性带His标签（C端）：PET24-(b)卡那抗性带His标签（C端）：PET21-(a)氨苄抗性带His标签（N端）+TrxA(硫氧还蛋白)：PET-32
shRNAs(short hairpin RNAs)在哺乳动物细胞中引发的基因沉默
,我们利用U6 RNA polymerase Ⅲ启动子产生的含有反向重复序列(21-29核苷酸)的转录子来形成shRNA，它能被Dicer加工并进入RNAi途径。携带有shRNA表达载体的质粒短暂转染哺乳动物细胞足以引起基因沉默。令人惊奇的是,应用不同靶定效率的shRNA，能产生类似表观等位基因现象的一系列不同程度的基因沉默。 几个因素可能影响基因沉默的效率,像靶序列的特征、转染的效率以及靶向mRNA和蛋白的丰度及稳定性。对于表达的shRNA,我们推荐每个靶基因采用3-6个不同的发夹
( 1 ) PRSETB 细菌表达质粒（Invitrogen ) : 用于 Ni-次氮基三乙酸（NTA ) 琼脂糖蛋白纯化的 His-tag；用于选择的氨苄青霉素和用于诱导蛋白质表达的异丙基-β-D-硫代半乳糖吡喃糖苷（IPTG )。 ( 2 ) pcDNA3 哺乳动物瞬时表达质粒（Invitrogen ) : 巨细胞病毒启动子和用于细菌选择的氨苄青霉素抗性基因。 2.2 生物化学和生物物理鉴定 ( 1 ) Luria-Bertani ( LB ) 培养基：10 g 胰蛋白胨，5 g 酵母
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