Sino Biological Human CCDC181 cDNA克隆表达质粒 人源全长 cdna质粒

基因差异表达技术

的不是cDNA全长而是其酶切片段。 SSH自从在克隆基因的实验中采用以来，其优势是非常明显的，主要表现在：①极大降低了假阳性率，由于SSH方法采用两次扣除杂交和两次PCR，保证了该方法具有较高特异性。据有关报道证明SSH方法假阳性率可降至6%；②具高度灵敏性，由于在反应中将丰度不同的单链分子含量归一化，保证了低丰度mRNA检测成功；③SSH法在一次反应中,可同时分离出上百个差异表达的基因,这一点远胜于DDRT-PCR和RAD。而其缺点与RAD类似。 四、交互扣除RNA差别显示技术（RSDD） 交互扣除

【分享】Human press METHODS IN MOLECULAR BIOLOGY

9. Protocols in Human Molecular Genetics. Edited by G. Methaw, 1991 10. Immunochemical Protocols. Edited by Manson, Margaret M., 1992 11. Practical Protein Chromatography Edited by Kenney, Andrew, 1992 12. Pulsed-Field Gel Electrophoresis Protocols

差异基因研究技术及其应用

expression，SAGE） SAGE其原理是以mRNA为模板，用生物素标记的Oligo（dT）为引物合成双链cDNA，以限制酶进行酶切，捕获cDNA 3′端；产物被分为两部分，分别与包含有标签内切酶位点的A、B连接子相接。经过酶切，就有可能得到只有9~10bp的标签序列。每两个标签的钝端结合后成为PCR的模板，以基于A、B连接子的引物进行PCR反应的结果是得到了大量每条包含两个不同来源标签的序列，接下来再用限制酶酶切、连接，就能将多个不同的标签链接在一起，克隆至质粒载体中后集中测序。SAGE可以检测不同