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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
Human CAGE1 Gene ORF cDNA clone expression plasmid
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:CAGE1
反应种属:Human
应用说明:Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述:Full length Clone DNA of Human cancer antigen 1
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文献和实验上真正的困难还是在于基因的外源表达和功能/活性等后续检测。 所以,建议你先做基因表达检测,然后选择性的再做基因克隆表达。 阳光海岛 基因的差异表达分两步,一是通过mRNA的变化来考察基因转录的改变,这部分用RealTimePCR或者SSH可以做到,第二是检查,蛋白表达量的变化来考察蛋白翻译的改变,这部分可用2D加细胞ELISA来做。 有两种思路,一种即楼上提及的将80个基因分别进行定量PCR,以得到这80个基因的差异
expression,SAGE) SAGE其原理是以mRNA为模板,用生物素标记的Oligo(dT)为引物合成双链cDNA,以限制酶进行酶切,捕获cDNA 3′端;产物被分为两部分,分别与包含有标签内切酶位点的A、B连接子相接。经过酶切,就有可能得到只有9~10bp的标签序列。每两个标签的钝端结合后成为PCR的模板,以基于A、B连接子的引物进行PCR反应的结果是得到了大量每条包含两个不同来源标签的序列,接下来再用限制酶酶切、连接,就能将多个不同的标签链接在一起,克隆至质粒载体中后集中测序。SAGE可以检测不同
肝脏组织中表达人甘露糖结合凝集素(mannose-binding lectin,MBL)。方法:采用PCR方法从pGEMT-MBL质粒中扩增人MBLcDNA序列,克隆人pUC19载体中,限制性酶切鉴定及测序正确后,将MBLcDNA克隆人真核表达载体pcDNA3质粒中,构建成pcDNA3-MBL质粒,经尾静脉大容量快速注射pcDNA3-MBL质粒20μg,8h后处死小鼠,Western Blot方法检测小鼠肝脏组织和血清中人MBL,免疫组织化学方法检测小鼠肝脏组织中人MBL的表达情况。结果:成功扩增出
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