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- 详细信息
- 文献和实验
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- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
Human GMEB2 Gene ORF cDNA clone expression plasmid
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:GMEB2
反应种属:Human
应用说明:Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述:Full length Clone DNA of Human glucocorticoid modulatory element binding protein 2
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文献和实验。 1.3 表达菌株的构建 Pichia.pastoris酵母菌体内无天然质粒,所以表达载体需与宿主染色体发生同源重组,将外源基因表达框架整合于染色体中以实现外源基因的表达。包括启动子、外源基因克隆位点、终止序列、筛选标记等。表达载体都是穿梭质粒,先在大肠杆菌复制扩增,然后被导入宿主酵母细胞。为使产物分泌胞外,表达载体还需带有信号肽序列。 毕赤酵母表达系统有多种分泌型表达质粒,有许多蛋白在毕赤酵母得到了高效分泌表达。胞外表达需要在外源蛋白的N末端加上一段信号肽序列,引导重组蛋白进入分泌途径,可使蛋白
含重组表达载体的大肠杆菌菌株的构建 1. PCR 修饰或限制性内切酶消化分离 DNA 片段,片段 5’ 端和 3’ 端带有与 T7 噬菌体启动子表达质粒(如 pET 载体; Studier et al. 1990 )对应的限制酶位点。 2. 含靶 cDNA/ 基因的 DNA 片段与表达载体连接。 3. 连接产物转化大肠杆菌菌株 HMS174 ( DE3 )或 BL21 ( DE3 )。将转化体铺
表达,即不仅可控制基因表达的“开关”,还可人为地调控基因表达量。 因此,利用真核表达系统来表达目的蛋白越来越受到重视。目前,基因工程研究中常用的真核表达系统有酵母表达系统、昆虫细胞表达系统和哺乳动物细胞表达系统。 1.酵母表达系统 最早应用于基因工程的酵母是酿酒酵母,后来人们又相继开发了裂殖酵母、克鲁维酸酵母、甲醇酵母等,其中,甲醇酵母表达系统是目前应用最广泛的酵母表达系统。目前甲醇酵母主要有H Polymorpha,Candida Bodini,Pichia
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