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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
Human ABCC13 Gene ORF cDNA clone expression plasmid
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:ABCC13
反应种属:Human
应用说明:Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述:Full length Clone DNA of Human ATP-binding cassette, sub-family C (CFTR/MRP), member 13, pseudogene
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文献和实验在基因功能研究过程中,常常使用的一种方法就是将目的基因转到靶细胞内进行瞬时表达(transient expression),以流式细胞仪检测细胞周期的变化,观察转基因对细胞增殖的影响。由于各种转基因方法的不同,转基因的效率也不同,往往是仅有一部分细胞可以表达目的基因,没有转基因的细胞将影响检测的结果。如何将已经转基因的细胞同未转基因的细胞区分开来进行检测,是一个技术上的难点。常用的一种方法就是将表达绿色荧光蛋白的质粒和目的基因共转染;在共转染时,加入目的基因表达质粒的量远高于表达GFP质粒
1)Flp-In系统 产生背景 随着新技术的不断革新,针对真核质粒转染构建稳定表达细胞株的方法也不断地创新,出现了TALEN、IOS、Cas9和Flp-In等技术,不断地提高稳定表达细胞株构建的成功率。 Flp-In系统——以其独特的优势,广泛应用于构建过表达或静默特定基因的稳定表达细胞株,用于特定基因的功能研究。Flp-In系统依据酿酒酵母的DNA重组系统的特点,高效构建稳定哺乳动物表达细胞株。这种DNA重组系统应用重组酶(Flp)和定点重组技术,将目的基因插入到哺乳动物指定的基因组中
研究领域中,CRISPR 技术日渐成熟,当然每家公司所使用的具体 protocol 跟质粒载体不尽相同,做出来的稳定细胞株还是有点差异的,编者就不多赘述。还有少数公司比如汉尹公司,也可以利用 CRISPR/Cas9 技术去提高细胞内源基因的表达,效果可以与转染过表达质粒相媲美,避免了外源基因对细胞的影响,优势显而易见。作为一家成熟的抗体公司,我们也会利用 CRISPR/Cas9 去 knockout 做敲除验证,这对于抗体特异性的判断是用 siRNA 所不能比的。如果研究人员经常利用 CRISPR
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