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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
Human FBXO44 Gene ORF cDNA clone expression plasmid
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:FBXO44
反应种属:Human
应用说明:Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述:Full length Clone DNA of Human F-box protein 44
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文献和实验以上,这时其ORF超过3000bp,做高保真PCR有难度。注:基金申请中,有时看到申请者人无意识的选做的恰就是大分子量蛋白,可谓不知者者无畏)。 5、但事实上真正的困难还是在于基因的外源表达和功能/活性等后续检测。 所以,建议你先做基因表达检测,然后选择性的再做基因克隆表达。 首先非常感谢这么细致的回复。 我想知道,基因克隆到绿色阳光蛋白载体中,转染细胞后,是否在细胞中看到绿色荧光蛋白就可以认为目的蛋白表达了,还需要进行抗体
试剂将si s转到细胞内。而采用si 表达载体和基于PCR的表达框架则属于:从转染到细胞的DNA模版中在体内转录得到si s。这两种方法的优点在于不需要直接操作。 4. si 表达载体 多数的si 表达载体依赖3种聚合酶III 启动子(pol III)中的一种,操纵一段小的发夹si 在哺乳动物细胞中的表达(1�4)。这3类启动子包括大家熟悉的人源和鼠源的U6启动子和人H1启动子。之所以采用 pol III启动子是由于它可以在哺乳动物细胞中表达更多的小分子,而且它是通过添加一串(3到6个)U来终止转录
RNA,不但能增加有效转染细胞的种类,而且在长期稳定表达载体的细胞株中,双链RNA能够长期发挥阻断基因的作用。 现在有多个报道说通过质粒表达siRNAs同样可以抑制特定基因的表达。当这种带有PolIII 启动子和shRNA编码序列的质粒转染哺乳动物细胞时,这种能表达siRNA的质粒确实能够下调特定基因的表达,抑制范围包括外源基因和内源基因。 腺病毒是体内转基因的常用载体。Xia HaiBin等用腺病毒做载体,在体内和体外表达dsRNA,并成功的阻断了基因的表达,从而实现了成体动物的基因
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