- ￥1890
- Sino Biological
- 北京
- HG22827-UT
- 2025年08月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃ to -80℃
- 保质期：
3个月
- 英文名：
Human FCHO2 Gene ORF cDNA clone expression plasmid
- 库存：
99
- 供应商：
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格：
1 Unit
基因靶点：FCHO2
反应种属：Human
应用说明：Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述：Full length Clone DNA of Human FCH domain only 2
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文献和实验别说话 先了解一下 外源基因在细胞中的表达可分为两大类。 一、瞬时表达 瞬时表达外源DNA不整合到宿主染色体中，虽然可以达到高水平表达，但通常只持续几天。瞬时表达所需的人力和时间比稳定表达少，但因为DNA摄入率和表达水平在不同实验中差异较大，不长久也不稳定。 二、稳定表达 稳定表达外源DNA整合到宿主细胞染色体上，或者相当于附加子可持续存在，可使宿主细胞长期表达目的基因。 然而，外源基因整合进宿主染色体上的几率很小，通常发生随机整合，其表达水平和整合位置有关，会
转染，一般2-3天。 shRNA是由能够产生此双链RNA的表达载体表达出来的，然后剪切成siRNA起作用，因此相对时效长一些，如果是稳定转染的表达质粒，就可以稳定表达。 这两种方法可以互补使用，瞬时表达可检测潜在的直接靶下游，还可以收时间梯度进行动力学分析，稳定表达可以检测一系列下游靶效应。不过发文章的话一种就够了。 lastone9853 bigbang_0_0 wrote: siRNA抑制是暂时的，对于体外培养的贴壁
质粒，因此细胞间会存在差异。总的来说，稳定转染的细胞只含有1-2个被整合的质粒。因此，稳定转染细胞的荧光表达量会低于瞬时转染的细胞； 2） 确定细胞转染48小时后或是新霉素筛选前才长满。因为生长接触抑制会降低目的基因的表达； 3）确定细胞在转染后48小时以及药物筛选过程中生长状态良好。如果在瞬时表达阶段细胞不健康，可能是提示有潜在的毒性； 4）做G418杀伤曲线。如果筛选用的药物太浓（不同批号间的药物浓度可能不同），选择压力过强。报告基因的表达水平与筛选抗性基因的不完全正相关，细胞在过高
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