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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
Human RFX3 Gene ORF cDNA clone expression plasmid
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:RFX3
反应种属:Human
应用说明:Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述:Full length Clone DNA of Human regulatory factor X, 3 (influences HLA class II expression)
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文献和实验III 启动子下游。由于涉及到克隆,这个过程需要几天的时间,同时也需要经过测序以保证克隆的序列是正确的。不过幸好载体容易大量扩增,这个优点足以弥补所有缺陷,特别是当载体在实验中确实有效的时候。毫无疑问,siRNA表达载体的优点在于这是众多方法中唯一可以进行长期研究的方法——带有抗生素标记的载体可以在细胞中持续抑制靶基因的表达,持续数星期甚至更久。即使是对转染带有筛选标记质粒的细胞进行瞬时筛选,也有助于富集带质粒的细胞。这也可以帮助解决一些难转染的细胞由于转染效率低造成的问题。最近多个厂家开始研究逆转
IPTG溶于100ml ddH2O中,0.22μm滤膜抽滤,-20℃保存。 二、操作步骤 (一)获得目的基因 1、通过PCR方法:以含目的基因的克隆质粒为模板,按基因序列设计一对引物(在上游和下游引物分别引入不同的酶切位点),PCR循环获得所需基因片段。 2、通过RT-PCR方法:用TRIzol法从细胞或组织中提取总RNA,以mRNA为模板,逆转录形成cDNA第一链,以逆转录产物为模板进行PCR循环获得产物。 (二)构建重组表达载体 1、载体酶切:将表达质粒用限制性内切
rRNA比例评估 Ø 基本比对统计,链特异数据评估 Ø Cufflink,stringtie转录本组装 2. 特性分析 Ø 序列,位点保守性分析 Ø 外显子个数,表达和长度分析 Ø 定量差异分析 3. 新LncRNA鉴定 Ø 与已知lncRNA库比对过滤 Ø 过滤exon Ø CPC,CNCI,phyloCSF编码潜能预测 Ø ORF长度过滤 Ø miRNA前体序列过滤 4. 功能分析 Ø 顺和反式靶基因预测 Ø 靶基因功能富集分析 Ø
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