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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
Human RQCD1 Gene ORF cDNA clone expression plasmid
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:CNOT9
反应种属:Human
应用说明:Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述:Full length Clone DNA of Human RCD1 required for cell differentiation1 homolog (S. pombe)
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文献和实验重链可变区域的分枝点和3-受体剪切位点组成。供体和受体剪切位点、分枝点的序列均作了改变以匹配最适剪切位点的共有序列。在Rluc的紧上游是T7启动子序列,可在体外合成海洋腔肠荧光素酶的转录物。Rluc的下游是SV40晚期poly A 序列, 提供有效的转录终止和mRNA多腺苷酸化。载体含有原核的复制起始区和β-内酰胺酶基因,可在大肠杆菌中选择质粒的扩增。图8 用Passive Lysis Buffer 制备细胞裂解物中萤火虫和Renilla荧光素酶的稳定性。用pGL3-Control 和pRL
时限短暂;瞬时表达系统的优点是简捷,实验周期短。大规模的瞬时表达技术是 近年来的一个研究热点。已有报道能放大到100 L反应器中生产重组蛋白,产量(分泌型蛋白)可达l~10 mg/L。不过该方法技术条件要求高,如质粒的纯度、转染的效率等。 稳定表达系统是指载体进入宿主细胞并经选择培养,载体DNA稳定存在于细胞内,目的蛋白的表达持久、稳定。由于需抗性选择甚至加压扩增等步骤,稳定表达相对耗时耗力。Geisse等以白血病抑制因子的制备为例,比较了几种不同稳定表达体系在产量及时间上的差异(表 3),把目的基因
骨髓瘤SP2/0细胞等。不同宿主细胞表达的重组蛋白其稳定性和蛋白糖基化类型不同,需根据要表达的目的蛋白选择最佳的宿主细胞。COS细胞是进行外源基因瞬时表达时用途最广的宿主,其重组载件易于组建,便于使用,而且对插入DNA的量或者采用基因组DNA序列的情况都没有什么限制,便于通过检测表达情况来确证cDNA的阳性克隆,也利于快速分析引入克隆化cDNA序列中的突变。CHO细胞则利于外源基目的稳定整合,易于大规模培养,能在无血清和蛋白的条件下生比,是用于真核生物基因表达软为成功的宿主细胞。已用于多种复杂的重组
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