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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
Human SLC25A17 Gene ORF cDNA clone expression plasmid
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:SLC25A17
反应种属:Human
应用说明:Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述:Full length Clone DNA of Human solute carrier family 25 (mitochondrial carrier; peroxisomal membrane protein, 34kDa), member 17
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文献和实验( 1 ) PRSETB 细菌表达质粒(Invitrogen ) : 用于 Ni-次氮基三乙酸(NTA ) 琼脂糖蛋白纯化的 His-tag;用于选择的氨苄青霉素和用于诱导蛋白质表达的异丙基-β-D-硫代半乳糖吡喃糖苷(IPTG )。 ( 2 ) pcDNA3 哺乳动物瞬时表达质粒(Invitrogen ) : 巨细胞病毒启动子和用于细菌选择的氨苄青霉素抗性基因。 2.2 生物化学和生物物理鉴定 ( 1 ) Luria-Bertani ( LB ) 培养基:10 g 胰蛋白胨,5 g 酵母
决定簇标记进行原位固定。这种方法既不需要对不同的蛋白分别进行表达和纯化,又可以在使用前才产生蛋白,从而解决了保持蛋白稳定的难题。具体说,为了既能够附着DNA,又能够保持DNA的构向以利于转录和翻译,研究者利用紫外线将补骨脂素-生物素(psoralen-biotin)和DNA表达质粒接合在一起。而且,每一个被表达的蛋白的碳端都标记了一个谷胱甘肽S- 转移酶(Glutathione S-transferase,GST),能够通过和预先印记在表达质粒旁边的GST抗体作用,从而使表达的蛋白固定在阵列
后,2000倍稀释大量培养。 含有疏水基团的重组蛋白往往对宿主菌有毒性。因此,除非有特殊的意义,应当去除插入片段中编码信号肽序列或穿膜区的序列。然而,也有少数包含信号肽的蛋白可以在膜间质少量的表达。这种情况下,建议诱导前培养温度降低为25度。 有些蛋白,尤其是小于10KDa的蛋白在E. coli中不稳定,可能很快被细菌中的蛋白酶降解。克服这种困难的方法包括:降低培养温度到30度;使用一种或多种蛋白酶缺陷的宿主菌;使用QIAGEN公司的表达质粒pQE-16、pQE-40,使生成目标多肽与DHFR的融合
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