Sino Biological SF3A2基因表达质粒 稳定/瞬时表达 SF3A2表达质粒

表达EGFP的质粒和目的基因共转染并流式检测

在基因功能研究过程中，常常使用的一种方法就是将目的基因转到靶细胞内进行瞬时表达（transient expression），以流式细胞仪检测细胞周期的变化，观察转基因对细胞增殖的影响。由于各种转基因方法的不同，转基因的效率也不同，往往是仅有一部分细胞可以表达目的基因，没有转基因的细胞将影响检测的结果。如何将已经转基因的细胞同未转基因的细胞区分开来进行检测，是一个技术上的难点。常用的一种方法就是将表达绿色荧光蛋白的质粒和目的基因共转染；在共转染时，加入目的基因表达质粒的量远高于表达GFP质粒

细胞转染

的质粒没有，如果没有就要做构建质粒，提取质粒等前期工作。质粒通过脂质体转染细胞的效率不高，目的基因整合到染色体上更是个随机事件，所以效率更进一步降低。你选择的时候把这些问题（试验目的，试验时间，实验室条件，试验经费等等）都应该考虑到。丁香园网友fxlys412：我是构建了真核表达质粒PcDNA3.1，然后想通过脂质体做稳定转染，使其目的蛋白再宿主细胞中稳定表达，但就是不知道能不能做的出来，万一转染率太低了的话，该怎么办？如何不用脂质体转染，还可以用什么方法可以达到实验得目的？望达人指点一二，在下不胜

毕赤酵母表达实验手册

的启动子之一。 ⑵ 表达质粒能在基因组的特定位点以单拷贝或多拷贝的形式稳定整合。 ⑶ 菌株易于进行高密度发酵，外源蛋白表达量高。 ⑷ 毕赤酵母中存在过氧化物酶体，表达的蛋白贮存其中，可免受蛋白酶的降解，而且减少对细胞的毒害作用。 Pichia.pastoris基因表达系统经过近十年发展，已基本成为较完善的外源基因表达系统，具有易于高密度发酵，表达基因稳定整合在宿主基因组中，能使产物有效分泌并适当糖基化，培养方便经济等特点。利用强效可调控启动子AOX1，已高效表达了HBsAg