- ￥1770
- Sino Biological
- 北京
- HG20467-UT
- 2025年08月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃ to -80℃
- 保质期：
3个月
- 英文名：
Human SDS Gene ORF cDNA clone expression plasmid
- 库存：
99
- 供应商：
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格：
1 Unit
基因靶点：SDS
反应种属：Human
应用说明：Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述：Full length Clone DNA of Human serine dehydratase
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文献和实验表达载体的构建方法及步骤 一、载体的选择及如何阅读质粒图谱 目前，载体主要有病毒和非病毒两大类,其中质粒 DNA 是一种新的非病毒转基因载体。 一个合格质粒的组成要素： （1）复制起始位点 Ori 即控制复制起始的位点。原核生物 DNA 分子中只有一个复制起始点。而 真核生物 DNA 分子有多个复制起始位点。 （2）抗生素抗性基因可以便于加以检测，如 Amp+ ,Kan+ （3）多克隆位点 MCS 克隆携带外源基因片段 （4） P/E 启动子/增强
）从倍增基因获得，也可以来自人工合成的基因。通过PCR获得感兴趣的DNA的方法是：首先，分离含有感兴趣的DNA片段的mRNA的总RNA，并通过逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）将RNA逆转录成cDNA。根据公布的NCBI基因编码序列（CD）设计寡核苷酸引物，并在引物中加入指定的限制酶位点。然后，通过PCR扩增感兴趣的DNA的编码区，用凝胶提取试剂盒纯化后，将DNA片段插入克隆载体中。通过RT-PCR将RNA逆转录成cDNA通过PCR扩增感兴趣的DNA的编码区经验虽然从RT-PCR中获取DNA片段是常用
。二、操作步骤（一）获得目的基因1、通过PCR方法：以含目的基因的克隆质粒为模板，按基因序列设计一对引物（在上游和下游引物分别引入不同的酶切位点），PCR循环获得所需基因片段。2、通过RT-PCR方法：用TRIzol法从细胞或组织中提取总RNA，以mRNA为模板，逆转录形成cDNA第一链，以逆转录产物为模板进行PCR循环获得产物。（二）构建重组表达载体1、载体酶切：将表达质粒用限制性内切酶（同引物的酶切位点）进行双酶切，酶切产物行琼脂糖电泳后，用胶回收Kit或冻融法回收载体大片段。2、PCR
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