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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
Human SYNJ2 Gene ORF cDNA clone expression plasmid
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:SYNJ2
反应种属:Human
应用说明:Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述:Full length Clone DNA of Human synaptojanin 2
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文献和实验质粒,因此细胞间会存在差异。总的来说,稳定转染的细胞只含有1-2个被整合的质粒。因此,稳定转染细胞的荧光表达量会低于瞬时转染的细胞; 2) 确定细胞转染48小时后或是新霉素筛选前才长满。因为生长接触抑制会降低目的基因的表达; 3)确定细胞在转染后48小时以及药物筛选过程中生长状态良好。如果在瞬时表达阶段细胞不健康,可能是提示有潜在的毒性; 4)做G418杀伤曲线。如果筛选用的药物太浓(不同批号间的药物浓度可能不同),选择压力过强。报告基因的表达水平与筛选抗性基因的不完全正相关,细胞在过高
,质粒进入细胞后以游离的形式存在。目的基因的表达是通过细胞的转录与翻译机制进行的。一个细胞可能‘吞入’数个质粒,因此细胞间会存在差异。总的来说,稳定转染的细胞只含有1-2个被整合的质粒。因此,稳定转染细胞的荧光表达量会低于瞬时转染的细胞; 2) 确定细胞转染48小时后或是新霉素筛选前才长满。因为生长接触抑制会降低目的基因的表达; 3)确定细胞在转染后48小时以及药物筛选过程中生长状态良好。如果在瞬时表达阶段细胞不健康,可能是提示有潜在的毒性; 4)做G418杀伤曲线。如果筛
。在此报道中我们描述了新的辅助质粒(pH3和pH5),排除了Ad共转染的需求。辅助质粒表达AAV的rep和cap基因和Ad E2A、VAI和E4基因。当辅助质粒在没有Ad感染的情况下共转染到人293细胞中,rAAV载体产量超过了pAAV/Ad包装质粒的80倍。另外,有复制能力的AAV在rAAV制备过程中少于0.00125%。此系统的主要优点是(1)无需感染性的腺病毒(2)只使用两个质粒就提高了转染效率和载体的产出。我们相信该双质粒转染系统因其简便性和高产出而使AAV载体系统能被更广泛地使用。该系统尤其
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