- ￥1770
- Sino Biological
- 北京
- HG19249-UT
- 2025年08月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃ to -80℃
- 保质期：
3个月
- 英文名：
Human C1QTNF5 Gene ORF cDNA clone expression plasmid
- 库存：
99
- 供应商：
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格：
1 Unit
基因靶点：C1QTNF5
反应种属：Human
应用说明：Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述：Full length Clone DNA of Human C1q and tumor necrosis factor related protein 5
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文献和实验决定簇标记进行原位固定。这种方法既不需要对不同的蛋白分别进行表达和纯化，又可以在使用前才产生蛋白，从而解决了保持蛋白稳定的难题。具体说，为了既能够附着DNA，又能够保持DNA的构向以利于转录和翻译，研究者利用紫外线将补骨脂素－生物素（psoralen-biotin）和DNA表达质粒接合在一起。而且，每一个被表达的蛋白的碳端都标记了一个谷胱甘肽S- 转移酶(Glutathione S-transferase，GST)，能够通过和预先印记在表达质粒旁边的GST抗体作用，从而使表达的蛋白固定在阵列
从新鲜的培养基上挑选单克隆，少量培养后，2000倍稀释大量培养。 含有疏水基团的重组蛋白往往对宿主菌有毒性。因此，除非有特殊的意义，应当去除插入片段中编码信号肽序列或穿膜区的序列。然而，也有少数包含信号肽的蛋白可以在膜间质少量的表达。这种情况下，建议诱导前培养温度降低为25度。 有些蛋白，尤其是小于10KDa的蛋白在E. coli中不稳定，可能很快被细菌中的蛋白酶降解。克服这种困难的方法包括：降低培养温度到30度；使用一种或多种蛋白酶缺陷的宿主菌；使用QIAGEN公司的表达质粒pQE
终止子在表达质粒的构建过程中常被忽略，但有效的转录终止子是表达载体必不可少的元件，因为它们具有极其重要的作用。贯穿启动子的转录将抑制启动子的功能，造成所谓的启动子封堵[64]。这种效应可以通过在编码序列下游的适当位置放置一转录终止子，阻止转录贯穿别的启动子来避免。同样地，在启动目的基因的启动子上游放置一转录终止子，将最大限度地减小背景转录[65]。另有资料证明，由强启动子启动的转录会使转录通读到复制区，造成控制质粒拷贝数的ROP蛋白的过量表达，从而导致质粒的不稳定[66]。另外，转录终止增强mRNA的稳定
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