- ￥4690
- Sino Biological
- 北京
- HG18345-UT
- 2025年08月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃ to -80℃
- 保质期：
3个月
- 英文名：
Human WNK4 Gene ORF cDNA clone expression plasmid
- 库存：
99
- 供应商：
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格：
1 Unit
基因靶点：WNK4
反应种属：Human
应用说明：Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述：Full length Clone DNA of Human WNK lysine deficient protein kinase 4
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文献和实验Systems）,大大提高siRNA表达载体对宿主细胞的侵染性,彻底克服某些细胞转染效率低的障碍,是实现哺乳动物细胞siRNAs瞬时表达与稳定表 达的理想工具.4、合成模板合成编码 shRNA的DNA 模板的两条单链,模板链后面接有RNA PolyIII聚合酶转录中止位点,同时两端分别设计 BamH I 和 Hind III 酶切位点,可以克隆到 siRNA 载体多克隆位点的 BamH I 和 Hind III 酶切位点之间.95℃,5min,缓慢退火, DNA 单链得到 shRNA 的 DNA 双链模板
别说话 先了解一下 外源基因在细胞中的表达可分为两大类。 一、瞬时表达 瞬时表达外源DNA不整合到宿主染色体中，虽然可以达到高水平表达，但通常只持续几天。瞬时表达所需的人力和时间比稳定表达少，但因为DNA摄入率和表达水平在不同实验中差异较大，不长久也不稳定。 二、稳定表达 稳定表达外源DNA整合到宿主细胞染色体上，或者相当于附加子可持续存在，可使宿主细胞长期表达目的基因。 然而，外源基因整合进宿主染色体上的几率很小，通常发生随机整合，其表达水平和整合位置有关，会
决定簇标记进行原位固定。这种方法既不需要对不同的蛋白分别进行表达和纯化，又可以在使用前才产生蛋白，从而解决了保持蛋白稳定的难题。具体说，为了既能够附着DNA，又能够保持DNA的构向以利于转录和翻译，研究者利用紫外线将补骨脂素－生物素（psoralen-biotin）和DNA表达质粒接合在一起。而且，每一个被表达的蛋白的碳端都标记了一个谷胱甘肽S- 转移酶(Glutathione S-transferase，GST)，能够通过和预先印记在表达质粒旁边的GST抗体作用，从而使表达的蛋白固定在阵列
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