- ￥2590
- Sino Biological
- 北京
- HG18117-UT
- 2025年08月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃ to -80℃
- 保质期：
3个月
- 英文名：
Human BCAS3 Gene ORF cDNA clone expression plasmid
- 库存：
99
- 供应商：
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格：
1 Unit
基因靶点：BCAS3
反应种属：Human
应用说明：Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述：Full length Clone DNA of Human breast carcinoma amplified sequence 3
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文献和实验以上，这时其ORF超过3000bp，做高保真PCR有难度。注：基金申请中，有时看到申请者人无意识的选做的恰就是大分子量蛋白，可谓不知者者无畏）。 5、但事实上真正的困难还是在于基因的外源表达和功能/活性等后续检测。 所以，建议你先做基因表达检测，然后选择性的再做基因克隆表达。 首先非常感谢这么细致的回复。 我想知道，基因克隆到绿色阳光蛋白载体中，转染细胞后，是否在细胞中看到绿色荧光蛋白就可以认为目的蛋白表达了，还需要进行抗体
。二、操作步骤（一）获得目的基因1、通过PCR方法：以含目的基因的克隆质粒为模板，按基因序列设计一对引物（在上游和下游引物分别引入不同的酶切位点），PCR循环获得所需基因片段。2、通过RT-PCR方法：用TRIzol法从细胞或组织中提取总RNA，以mRNA为模板，逆转录形成cDNA第一链，以逆转录产物为模板进行PCR循环获得产物。（二）构建重组表达载体1、载体酶切：将表达质粒用限制性内切酶（同引物的酶切位点）进行双酶切，酶切产物行琼脂糖电泳后，用胶回收Kit或冻融法回收载体大片段。2、PCR
试剂将si s转到细胞内。而采用si 表达载体和基于PCR的表达框架则属于：从转染到细胞的DNA模版中在体内转录得到si s。这两种方法的优点在于不需要直接操作。 4. si 表达载体 多数的si 表达载体依赖3种聚合酶III 启动子(pol III)中的一种，操纵一段小的发夹si 在哺乳动物细胞中的表达(1�4)。这3类启动子包括大家熟悉的人源和鼠源的U6启动子和人H1启动子。之所以采用 pol III启动子是由于它可以在哺乳动物细胞中表达更多的小分子，而且它是通过添加一串（3到6个）U来终止转录
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