Sino Biological 人C4A基因ORF cDNA克隆表达质粒 全长克隆DNA C4A cDNA克隆

DNA的克隆

mRNA逆转录合成的双链cDNA分子。由于基因组DNA较大，不利于克隆，因此有必要将其处理成适合克隆的DNA小片段，常用的方法有机械切割和核酸限制性内切酶消化。若是基因序列已知而且比较小就可用人工化学直接合成。如果基因的两端部分序列已知，根据已知序列设计引物，从基因组DNA 或cDNA中通过PCR技术可以获得目的基因。二 载体的选择基因工程的载体应具有一些基本的性质：1）在宿主细胞中有独立的复制和表达的能力，这样才能使外源重组的DNA片段得以扩增。2）分子量尽可能小，以利于在宿主细胞中有较多的拷贝

基因分离克隆的方法

模cDNA文库测序的序列中确定新基因：首先确定获得的cDNA是否为基因全长cDNA，确定是否有典型的ORF及3’端及5’端。而后可以通过网上搜索确定是否为新的基因，同源比对在判断是否为新基因，若通过检验则为新的基因。10 基因分离克隆的新技术除上述几种基本的方法外，随着生物技术的发展和传统技术的改良，基因可隆的方法又有许多新的技术出现。如基因表达序类标记分析（SAGE）；由DDRT-PCR演变而来的代表性差异分析（RDA），包括基因组DNA（gDNA）的RDA和cDNA的RDA；抑制型差减杂交（SSH

C4分子

的基因定位于第6号染色体的HLA-DR和HLA-B位点间一段 基因组 DNA上。C4由两个基因C4A * 和C4B * 所编码，因此血清中的C4分子也有两种类型即C4A和C4B，但二者具有高度同源性（仅有少数氨基酸不同）目前C4A * 和C4B * 的cDNA克隆均已成功并进行了序列分析。C4A、C4B、B因子及C2均属于MHC的第Ⅲ类分子。