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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
Human p130 Gene ORF cDNA clone expression plasmid
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:RBL2
反应种属:Human
应用说明:Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述:Full length Clone DNA of Human retinoblastoma-like 2 (p130)
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文献和实验tianjiaoya 我想构建一个真核表达质粒,用这个真核表达质粒来表达绿色荧光蛋白,但是我想让绿色荧光蛋白的表达受酵母菌GLA4转录因子的调控,也就是说有GLA4存在,这个质粒就表达绿色荧光蛋白,没有GLA4存在,就不表达绿色荧光蛋白。当然需要对真核表达质粒上的启动子做相应的调整,但是我现在的问题是,转录因子GLA4能不能对质粒上有相应调控元件的表达盒,进行调控?据说GLA4上有核定位元件,要是将这个核定位序列删除,可行吗?据说核内有很多的辅助因子,参与了蛋白表达
"把基因表达量调高"听起来是个简单需求,但用 CRISPRa 和用 cDNA 过表达质粒,得到的细胞模型和结论都可能完全不同。选错的话,表型实验从一开始就偏了。 先说结论:过表达质粒是在细胞质里额外生产一份蛋白,表达量远高于生理水平、不考虑 isoform 和调控背景、也无法保证定位正确;CRISPRa 是在内源基因组位点上激活转录,产物是天然的剪接 isoform、受内源调控元件约束、表达量更接近生理范围。想问"这个基因多了会怎样"用过表达,想问"把这个基因的内源表达调高
发表[1,2,3]。国内针对外源基因在原核细胞中高效表达的关键因素,构建了高效表达载体[4],并在此基础上成功表达了一系列细胞因子的基因[5,6,7]。我们在分析了国内外有关在原核系统中表达蛋白的实验资料的基础上,对在大肠杆菌中高效表达外源蛋白的策略所涉及的内容进行全面的总结,以期有助于我国在这方面的研究。 1.有效表达载体的构型 构建表达质粒需要多种元件,需要仔细考虑它们的组合,以保证最高水平的蛋白质合成。E.coli 表达载体的基本结构[8]。 启动子(以杂和的tac 启动子为例
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