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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
Human p130 Gene ORF cDNA clone expression plasmid
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:RBL2
反应种属:Human
应用说明:Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述:Full length Clone DNA of Human retinoblastoma-like 2 (p130)
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文献和实验tianjiaoya 我想构建一个真核表达质粒,用这个真核表达质粒来表达绿色荧光蛋白,但是我想让绿色荧光蛋白的表达受酵母菌GLA4转录因子的调控,也就是说有GLA4存在,这个质粒就表达绿色荧光蛋白,没有GLA4存在,就不表达绿色荧光蛋白。当然需要对真核表达质粒上的启动子做相应的调整,但是我现在的问题是,转录因子GLA4能不能对质粒上有相应调控元件的表达盒,进行调控?据说GLA4上有核定位元件,要是将这个核定位序列删除,可行吗?据说核内有很多的辅助因子,参与了蛋白表达
发表[1,2,3]。国内针对外源基因在原核细胞中高效表达的关键因素,构建了高效表达载体[4],并在此基础上成功表达了一系列细胞因子的基因[5,6,7]。我们在分析了国内外有关在原核系统中表达蛋白的实验资料的基础上,对在大肠杆菌中高效表达外源蛋白的策略所涉及的内容进行全面的总结,以期有助于我国在这方面的研究。 1.有效表达载体的构型 构建表达质粒需要多种元件,需要仔细考虑它们的组合,以保证最高水平的蛋白质合成。E.coli 表达载体的基本结构[8]。 启动子(以杂和的tac 启动子为例
-16、pQE-40,使生成目标多肽与DHFR的融合蛋白;如果是纯化过程中蛋白易降解,则可以在纯化试剂中加入甘油以及蛋白酶抑制剂,并且确保整个操作在4度完成。 2、如何在E. coli中表达高度毒性的蛋白? 在E. coli中表达高度毒性的蛋白往往是很困难的。毒性基因表达‘泄漏’会杀死宿主菌,尤其在早期的生长或转化后,可以使含有突变的不表达质粒的细菌选择性生 长。因此,要表达高毒性的蛋白,需要更高水平的lac 抑制蛋白。推荐同时使用QIAGEN公司的pQE-80L系列表达载体和M15
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