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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
3个月
- 英文名:
Human RASGRP4 Gene ORF cDNA clone in cloning vector
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:RASGRP4
反应种属:Human
应用说明:
cDNA描述:Full length Clone DNA of Human RAS guanyl releasing protein 4
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文献和实验mRNA逆转录合成的双链cDNA分子。由于基因组DNA较大,不利于克隆,因此有必要将其处理成适合克隆的DNA小片段,常用的方法有机械切割和核酸限制性内切酶消化。若是基因序列已知而且比较小就可用人工化学直接合成。如果基因的两端部分序列已知,根据已知序列设计引物,从基因组DNA 或cDNA中通过PCR技术可以获得目的基因。二 载体的选择基因工程的载体应具有一些基本的性质:1)在宿主细胞中有独立的复制和表达的能力,这样才能使外源重组的DNA片段得以扩增。2)分子量尽可能小,以利于在宿主细胞中有较多的拷贝
。 SuperScript cDNA文库使用pCMVSPORT构建,有几种人组织来源可供选择,这些文库有很大一部分是全长的插入片段,可以完全代表来源mRNA。 4、入门克隆的切入点——克隆资源 您可以从与10000个人类基因相关的35000个克隆中进行选择,这些克隆的70%以上是全长序列的。这些克隆来源于使用特殊的高级cDNA文库构建技术、oligo dT引物以及SuperScript II 反转录酶所构建的文库。许多克隆来源于I.M.A.G.E.协会,NCI CGAP 项目,ResGen库或UltimateORF
上面简单介绍了鉴定DNA结合元件所结合蛋白质的最常用的方法,对蛋白质更深入的分析应对其相应的基因进行克隆。基因克隆后,就可以通过基因突变判断蛋白质和某生物过程的关系,确定负责蛋白质活性的结构域,分析该蛋白质的作用机制和调控模式。 1. 蛋白质纯化法和序列分析法 克隆DNA结合蛋白,首选蛋白质纯化法,在得到氨基酸序列后,设计PCR简并引物,用于扩增基因片段,最后通过cDNA文库筛选得到全长cDNA。该方法在共价交联有目的DNA序列的寡核苷酸多联体的柱层析树脂中进行。这种技术称为序列
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