Sino Biological 人FOXO4表达质粒 稳定/瞬时哺乳动物表达

真相揭秘 | 为什么构建稳定表达细胞株这样难？

别说话 先了解一下 外源基因在细胞中的表达可分为两大类。   一、瞬时表达 瞬时表达外源DNA不整合到宿主染色体中，虽然可以达到高水平表达，但通常只持续几天。瞬时表达所需的人力和时间比稳定表达少，但因为DNA摄入率和表达水平在不同实验中差异较大，不长久也不稳定。   二、稳定表达 稳定表达外源DNA整合到宿主细胞染色体上，或者相当于附加子可持续存在，可使宿主细胞长期表达目的基因。   然而，外源基因整合进宿主染色体上的几率很小，通常发生随机整合，其表达水平和整合位置有关，会

【求助】siRNA沉默的效果是暂时的？

转染，一般2-3天。 shRNA是由能够产生此双链RNA的表达载体表达出来的，然后剪切成siRNA起作用，因此相对时效长一些，如果是稳定转染的表达质粒，就可以稳定表达。 这两种方法可以互补使用，瞬时表达可检测潜在的直接靶下游，还可以收时间梯度进行动力学分析，稳定表达可以检测一系列下游靶效应。不过发文章的话一种就够了。 lastone9853 bigbang_0_0 wrote: siRNA抑制是暂时的，对于体外培养的贴壁

表达EGFP的质粒和目的基因共转染并流式检测

在基因功能研究过程中，常常使用的一种方法就是将目的基因转到靶细胞内进行瞬时表达（transient expression），以流式细胞仪检测细胞周期的变化，观察转基因对细胞增殖的影响。由于各种转基因方法的不同，转基因的效率也不同，往往是仅有一部分细胞可以表达目的基因，没有转基因的细胞将影响检测的结果。如何将已经转基因的细胞同未转基因的细胞区分开来进行检测，是一个技术上的难点。常用的一种方法就是将表达绿色荧光蛋白的质粒和目的基因共转染；在共转染时，加入目的基因表达质粒的量远高于表达GFP质粒