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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Human SQSTM1 Gene ORF cDNA clone expression plasmid, N-Flag tag
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
1 Unit
基因靶点:SQSTM1
反应种属:Human
应用说明:Stable or Transient mammalian expression
cDNA描述:Full length Clone DNA of Human sequestosome 1 with N terminal Flag tag.
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文献和实验会怎样"用 CRISPRa。 --- 一、机制差异决定了两者能回答的问题不同 过表达质粒(cDNA / ORF) 外源启动子(CMV、EF1α 等)驱动,表达量与内源调控完全脱钩; 通常只包含单一 CDS,不含内含子和 UTR; 表达量可达到内源的几十到几百倍; 可携带标签(FLAG、HA、GFP)方便检测。 CRISPRa(dCas9-VP64 / VPR / SAM / SunTag) 失活 Cas9(dCas9)融合转录激活域,被 gRNA 引导至靶基因启动子区; 激活的是内源位点,转录本包含完整的内含
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的蛋白连接(IPL)反应. IPL连接反应可用于将荧光,生物素和/或非编码氨基酸序列连接到原核表达的蛋白质的C-端.另外,目的蛋白N-端与内含肽融合体可以通过改变pH或者温度使目的蛋白从几丁质树脂上释放下来.这种方法适用于纯化对DTT或2-巯基乙醇敏感的蛋白.而且C-端融合可以用来纯化N-端不带有甲硫氨酸(Met)的蛋白.而目的基因插入到两个intein之间可以形成环化的蛋白,且在连接位点形成一个肽键.所以IMPACT系统除了普通的原核表达,还有数种其它用途,产生的目的蛋白可带有N末端的半胱
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