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1g
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文献和实验CH>2 ICONH>2 ,是和碘乙酸一样,可通过下列反应不可逆地抑制 SH酶类的物质。 R- SH+ ICH>2 CONH>2 → R- S- CH>2 CONH>2 + HI
(1)硫酸(sulphuri acid)通用显色剂。 试液: a、5%浓硫酸乙醇或乙酐溶液 b、浓硫酸与甲醇或乙醇等体积混合 c、15%浓硫酸正丁醇溶液 方法:用以上任一试液喷洒或浸湿晾干,于110摄氏度加热至呈色,或达最强荧光。 (2)碘(iodine) 通用显色剂。 试液: a:0.5%碘的氯仿溶液。 喷后处理:待薄层上过量碘挥散,喷1%淀粉溶液,斑点转为兰色,如有过量碘留在薄层上,则背景也呈兰色。 b:碘蒸气:将少许碘晶体放入一密闭的容器内,使之充满饱和碘
(1)还原SDS处理:在上样buffer中加入SDS和DTT(或Beta巯基乙醇)后,蛋白质构象被解离,电荷被中和,形成SDS与蛋白相结合的分子,在电泳中,只根据分子量来分离。一般电泳均按这种方式处理,样品稀释适当浓度,加入上样Buffer,离心,沸水煮5min,再离心加样。 (2)带有烷基化作用的还原SDS处理:碘乙酸胺的烷基化作用可以很好的并经久牢固的保护SH基团,得到较窄的谱带;另碘乙酸胺可捕集过量的DTT,而防止银染时的纹理现象。100μl样品缓冲液中10μl 20%的碘
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