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- 上海羽朵生物
- YDS3857
- 2025年07月09日
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- 文献和实验
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- 规格：
25T
| 单位 | 盒 |
|---|
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文献和实验曲霉毒素M1。 3. 所需设备和耗材 黄曲霉毒素免疫亲和柱：Welchrom® IAC (1ml，25支/盒；3ml，15支/盒)（上海月旭提供）；高效液相装置带荧光检测器；均质机；水平振荡器；SPE转接头及50ml大容量上样器：Welchrom® SPE Adapter（上海月旭提供）；分析天平（精度0.02 g)；SPE装置带抽真空系统：Welchrom® SPE Device（上海月旭提供）；黄曲霉毒素M1标准品；PBS 缓冲溶液：称取1.16 g Na2HPO4，0.20 g KH
免疫亲和层析技术使用单克隆抗体或经过亲和层析纯化的多克隆抗体。在某些情况下，可用未纯化的多克隆抗体，但一般不使用混合的单克隆抗体。 1. 应用多克隆抗体进行免疫亲和层析 使用多克隆抗体进行免疫亲和层析有一定的局限性，因为多克隆抗体通常结合抗原分子上的多个表位，虽然亲合力高，但洗脱困难。当一种抗原与多种不同的抗体结合后，需要很苛刻的洗脱条件，通常会损坏抗体层析柱，至少也会使部分抗原变性。在这种情况下，每种抗原和抗体相互作用的洗脱条件不同，故难以建立有效的洗脱条件。应用多克
实际上，从免疫亲和层析柱上洗脱抗原的操作比较简单，而且也比较迅速。主要工作是设计和摸索各种有效的洗脱条件。可以采用三种类型的方法进行洗脱，使抗原抗体复合物解离：①使用较苛刻的条件；②加入模拟结合位点的饱和量小分子化合物，和/或③使用一种能引起构象改变而使抗原释放的试剂。 最常用的洗脱方法是基于破坏抗体与抗原之间的结合键。洗脱条件可以较为强烈，使抗体和抗原变性，或比较温和，使抗原和抗体仍保持原来活性。 采用相对强烈的洗脱条件应根据亲和层析柱所用抗体而定。如果使用的是亲和
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