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江西江蓝纯生物试剂有限公司
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文献和实验;3. 用等体积酚/氯仿/异戊醇抽提样品,1700×g,离心 10 min。如果样品溶解得不好,再加 1 体积不含蛋白酶 K 的消化缓冲液,重复离心。如果在界面上有一层厚的白色物质,重复抽提一次,将上层 (水溶液) 转移至一个新离心管中;4. 加入 1/2 体积 7.5mol/L 乙酸铵和 2 倍体积 100% 乙醇,12 000 rpm 离心 2 min;5. 用 70% 乙醇洗涤,晾干,沉淀用 TE 缓冲液或无菌双蒸水重新溶解, 使终浓度在约 1 mg/mL。注: 加入 0.1% 的 SDS 和 1? 滋
文献建立了一套稳定的三维类器官培养方法,适用于人源和鼠源的小肠及大肠不同区段。系统梳理了各肠道区段的隐窝分离方案、类器官培养方法,以及隐窝形态和生长特性。 实验材料 1.隐窝分离试剂 ①无钙镁离子磷酸盐缓冲液(PBS); ②0.5M乙二AN四乙酸(EDTA)溶液; ③70μm细胞筛; ④洗涤缓冲液:汉克斯平衡盐溶液(HBSS),添加0.5mg/mL庆大霉素、2.5μg/mL两性霉素B、100U/mL青霉素(Pen)和100U/mL链霉素(Strep
切割成大小约0.5cm×0.5CM、厚为0.1cm的小块,再用金刚砂轮磨成厚约10—50μm(以便在相差显微镜下观察)的薄骨片。使用前用超声波清洗仪超声洗涤3次,每次约10min。然后依次浸泡在3个盛有含青霉素(1000IU/ml)、链霉素(1000μg/ml)、两性霉素B(3μg/ml)的抗生素溶液的小容器中,每次10—20min。最后可浸于盛有含抗生素的培养液的容器内,置4℃(短期)或-20℃(较长期)冰箱内保存备用; 2. 取生后3—5d的大鼠,拉颈处死后置于盛有75%酒精的容器中,消毒
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