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- 详细信息
- 文献和实验
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- 供应商:
上海晶抗生物工程有限公司
- 库存:
20
- 运输方式:
干冰运输
- 规格:
1×106 cells/细胞培养瓶
产品规格: 1×106 cells/细胞培养瓶
运输及保存条件
活细胞常温运输,接收后请立即放入细胞培养箱培养。冻存细胞干冰运输,接收后请放入液氮中保存,或立即复苏。
细胞特性
来源:35岁女性肝癌患者的癌旁组织。
形态:上皮细胞样。
培养特性:贴壁生长。
支原体、细菌、真菌检测为阴性。
完全培养液主要成分
RPMI-1640 + 10% fetal bovine serum +双抗。
QSG-7701人正常肝细胞使用方法
细胞复苏
1.从液氮或干冰中取出冻存管迅速放入37℃水浴中,并不时摇动,在1分钟内使其完全融化。
2.吸出细胞,800 g/min离心5分钟,弃上清,加入适量完全培养液重悬细胞后接种于25 cm2培养瓶中,置37℃,5% CO2细胞培养箱中培养。
细胞传代
1.当细胞长到80%-90%融合时,弃去培养上清,用PBS(不含钙、镁离子)洗细胞1-2次。
2.加2 ml 0.05% Trypsin-EDTA于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,当细胞大部分变圆并脱落时,加入1 ml完全培养液终止消化。
3.轻轻吹打后吸出细胞,800 g/min离心5分钟,弃上清,加入适量完全培养液重悬细胞后按1:3比例接种于25 cm2培养瓶中,置37℃,5% CO2细胞培养箱中培养。
细胞冻存
1.当细胞生长状态良时,弃去培养上清,用PBS(不含钙、镁离子)洗细胞1-2次。
2.加2 ml 0.05% Trypsin-EDTA于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,当细胞大部分变圆并脱落时,加入1 ml完全培养液终止消化。
3.QSG-7701人正常肝细胞轻轻吹打后吸出细胞,800 g/min离心5分钟,弃上清,加入适量冻存液(90% fetalbovine serum + 10% DMSO)后重悬细胞。经逐步降温后转入液氮冻存。
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肝是人体内体积最大的实质性腺体,是具有重要而复杂的代谢功能的器官。它具有肝动脉和肝静脉双重的血液供应,且有肝静脉及胆道系统出肝,加上丰富的血窦及精巧的肝小叶结构,以及肝细胞中富含线粒体、内质网、核蛋白体和大量酶类,因而能完成复杂多样的代谢功能。 每个肝细胞平均约含400个线粒体,呈圆形、椭圆形或棒形。线粒体与三羧酸循环、呼吸链及氧化磷酸化、脂肪酸的β-氧化及酮体生成、氨基酸的脱氨基、转氨基及尿素合成等有密切关系。线粒体对缺氧特别敏感,易于受损伤。肝细胞的粗面内质网是合成各种蛋
目的:通过特异性阻断PI3K和mTOR,观察HepG2和Hep3B细胞株PI3K/Akt/mTOR信号通路活性及生物学行为的改变,探讨相关的分子机制。 方法:在培养的HepG2、Hep3B人肝癌细胞株和人正常肝细胞株QSG-7701上,以免疫印迹方法(Western blot)检测各细胞株中PI3K(p110α亚单位)、PTEN、pAkt(S473,T308)和p-mTOR(S2448)的表达情况;分别用 PI3K抑制剂LY294002(50μmol/ml)和mTOR抑制
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