分子克隆与质粒构建服务

克隆构建是分子生物学研究中最常用的手段之一，也占据了大量的科研时间和精力，我司推出保证型分子克隆与载体构建服务，让您的实验省时省力省心。


我们为您现货定制，您只需提供基因号，我们按照您的具体要求做好即用型的质粒给您，费用低，周期快，保证测序结果，后付费，无后顾之忧。
 
          插入基因片段≤1kb        1500元 
      1kb＜插入基因片段≤2kb       2000元 
      2kb＜插入基因片段≤3kb       2500元 
      3kb＜插入基因片段         根据您的项目评估，合理费用
（交付形式为：20ul重组小提质粒）
   
shRNA的设计和构建，2400元/基因， 设计三个靶点，保证沉默效果，无效果时免费设计第四个靶点，仍无效果，不收取任何费用。
 
无模板或模板难以获得的，可全基因合成：（价格包含亚克隆，以完全符合您的要求的质粒形式交付。）

服务内容	服务价格（元）	服务周期
基因合成 (0.5kb＜合成片段≤1.5kb)	2.0/bp	2-3周
基因合成 (1.5kb＜合成片段≤3kb)	2.2/bp	2-3周
基因合成 (3kb＜合成片段≤5kb)	2.8/bp	3-4周
基因合成 (5kb＜合成片段)	询价	商定

 
1.       TA克隆
特点
      高品质保障，高特异性、保真度和性能；
      任何高难度的基因，未能调取或完成，不收取任何费用；
      拥有多种真核生物（细胞）或组织的cDNA文库
服务流程
1）  总RNA（基因组DNA）的提取
2）  以总RNA（基因组DNA）为模板通过RT-PCR（PCR）扩增得到目的基因
3）  PCR产物和pMD19-T载体连接
4）  转化及筛选重组子
5）  重组子测序及结果分析
送样要求
       1）  实验材料：须新鲜，请您采样后立即放入液氮中速冻或加入样品稳定剂；
       2）  基因组DNA或总RNA：无明显降解，总量大于4 mg。
提供结果
        含有目的基因的质粒（或PCR产物），提供测序报告文件。
质量保证
         由于材料的个体差异及PCR过程中会产生突变等原因，我们不保证获取的基因与参考序列的碱基完全一致。


2.        亚克隆
特点
      丰富的载体构建经验，成功率高
      通过各种DNA克隆方法，可以短时、高效、保质地完成服务
服务流程
1）PCR产物TA克隆：克隆至带有“T”末端的载体上，如pMD19-T
2）目的基因亚克隆：将含有目的基因的质粒采用酶切方法克隆至商品化的表达载体或改造后的特殊载体上
3）以质粒为模板PCR扩增目的基因后克隆：将质粒上的一段序列通过PCR加入酶切位点或将几个不同来源的片段通过PCR拼接后进行克隆。
送样要求
     1）  模板信息：原始序列名称
     2）目的载体信息：客户自己构建的质粒须提供测序结果
     3）目标DNA片段序列及两端酶切位点
     4）非常用限制性内切酶由客户自己提供，或我们帮忙订购，费用由客户自理，剩余产品返回。
提供结果
      含有目的基因的质粒，提供测序报告文件。


3.  定点突变
特点
     可以应用到氨基酸置换、碱基插入、缺失、标签插入、酶切位点插入、缺失等多个方面。
    使用商业化的Kit或overlap-PCR等方法进行实验，在短时间内即可获得突变好的基因。分析复杂模板，设计突变方案，解决各种实验难题。
服务流程
     1） 向指定位置进行碱基置换、插入或者缺失，制作变异导入的基因
     2） 使用Mutazyme™酶消化甲基化质粒模板，而选择突变质粒DNA
     3） 转化大肠杆菌，挑选转化子进行测序鉴定
送样要求
       1）模板质粒（>100 ng/μl，总量≥5 μg）或者新鲜的甘油菌液
       2）突变前后的碱基序列及相应载体信息（名称、大小、抗性）
       3）基因两端酶切位点
提供结果
        提供突变好的质粒、甘油菌及报告和测序电子文件
质量保证
       保证测序结果与指定的突变完全一致，并保留客户原始序列的完整性