黄/蓝色溶酶体荧光探针

激光共聚焦显微镜技术的应用

，使用紫外光或可见光激发荧光探针，利用计算机进行图象处理，对生物样品进行定性、定量、定时和定位研究。已广泛应用于细胞生物学、生理学 、病理学、解剖学、胚胎学、免疫学和神经生物学等领域。 一. 组成 倒置或直立荧光显微镜 、扫描头(照明针孔、探测针孔、荧光滤片系统、镜扫描系统和光电倍增管)、扫描头控制电路、计算机和图像输出设备 二. 原理 Confocal 利用放置在光源后的照明针孔和放置在检测器前的探测针孔实现点照明和点

共聚焦激光扫描显微镜的应用及荧光探针

，DiBAC4(3)为带负电荷的阴离子慢反应染料。该探针本身无荧光，当进入细胞与胞浆内的蛋白质结合后才发出荧光，测量时要求细胞浸在荧光染料中。当细胞内荧光强度增加即膜电位增加示细胞去极化；反之，细胞内荧光强度降低即膜电位降低示细胞超极化。Rhodamine 123主要用于线粒体膜电位测量。Rhodamine123是一种亲脂性阳离子荧光探针，当线粒体膜内侧负电荷增多时，荧光强度增加，与DiBAC4(3)的表示形式相反。 4． pH值 正常细胞胞浆内的pH一般在6.8～7.4的范围，而某些细胞器如溶酶体

3D 活/死细胞测定的分析工作流程

，然后第二天用 NucView 550 (Biotium) 施用不同浓度的星形孢菌素（STS）。NucView 550 是 caspase-3 荧光探针，死细胞核用红色荧光染色。用 STS 和 NucView 550 处理后，将 HT-29 微球用 4% 多聚甲醛固定并用 0.5%Triton X-100 / PBS（-）通透性处理。微球的细胞核在 4°C（39.2°F）下用 Hoechst 33342 过夜染色。染色后，用 SCALEVIEW-S4 将微球透明化。   成像和分析 我们使用 FV