即用型 碘化丙啶(PI)染液

关于PI（碘化丙啶）的讨论

胰蛋白酶消化(37℃、30 min)分散, 置于4℃冷乙醇中固定后, 在1×109个细胞/L密度的细胞悬液中加入1 ml碘化丙啶(PI)染液(100mg/L), 4℃染色30 min, 用FACS流式细胞仪测定荧光强度， 激发波长488 nm，每次测定106 个细胞。采用Modfit 分析软件进行细胞DNA含量分析， 低于G1 期二倍体DNA含量的细胞为凋亡细胞。2、 FACS检测凋亡细胞的亚二倍体DNA. 新鲜小鼠胸腺细胞细胞加入75％乙醇过夜, 次日用PBS洗2次, 加入PI(碘化丙啶)低渗染液

碘化丙啶染色

碘化丙啶染色1．原理 碘化丙啶(propidium iodide，PI)不能穿人完整的活细胞膜中，即正常细胞和凋亡细胞在不固定的情况下对PI拒染，而坏死细胞由于失去膜的完整性，PI可进入细胞内与DNA结合，根据此特点，使用PI染色可鉴别死细胞。如果对活细胞染色必须在染色前进行固定，以增加细胞膜对染料的通透性。2．溶液配制 使用0．01mol／LPBS(pH 7．4)配制终浓度为0．5mg／ml的PI工作液。3．染色程序(1)单层细胞培养标本经预冷70％乙醇固定1小时，4℃；(2)0．01

【求助】有关流式PI染色测量细胞周期

的时候出问题了 细胞估计已经破裂 固定时候应该缓慢添加固定液 有的时候固定液就是用PBS和无水乙醇配置的。 Fasta921 我做的步骤：接种适当浓度细胞于培养皿中，培养过夜后，经0.25%胰蛋白酶消化,冷磷酸盐缓冲液(PBS)洗涤后离心,用70%(体积分数)预冷乙醇悬浮细胞于-20度固定过夜后,离心收集细胞,用PBS洗3次去除乙醇,细胞团重悬于PBS中,用20 μg/ml含RNaseA的碘化丙啶PI染色液避光染色30 min,经100目尼龙