即用型CE膜透析袋(截留分子量100-500Da,直径10m

超滤法

在对水施加一定的压力后，高分子物质胶体物质就由膜所阻止，而水和低分子物质透过滤膜的过程叫超滤。 一、超滤的基本原理 一般认为超滤是一种筛孔分离过程主要用来截留分子量高于500的物质。在静压差的作用下，原料液中溶剂和小分子的溶质粒子从高压的料液侧透过膜到低压侧，通常称为滤出液或透过液；而大分子的溶质粒子组分被膜所阻截，使它们在滤剩液（或称浓缩液）中浓度增大。按照这种分离机理，超滤膜具有选择性的主要原因是形成了具有一定大小和形状的孔，而聚合物质的化学性质对膜的分离特性影响不大。因此，可以用细孔模型

一篇搞定 IP、co-IP 实验

糖，建议进行 Pre-clear；如果使用磁珠，此步可忽略 抗 X 抗体的轻链（25 kD）和重链（50 kD） 更侧重于如何在实验上进行优化（见下文） *注意：总蛋白上样量过多也会造成 非特异性结合，建议上样量为 500 ug-1 mg。上样之前一定要先用 BCA 定个量！定个量！定个量！ pre-clear：上样前先用裂解液过一遍柱子，减少基质本身对蛋白的吸附 Output：在某些 co-IP 实验中，实验人员会把IP后的上清分别进行诱饵蛋白 X 和靶蛋白 Y 的 WB 检测

包涵体提出、纯化、复性必胜技

Arginine 0.25 mM EDTA 0.2mM PMSF 0 M 尿素 溶液pH调节到8.0 透析24小时 10mM Tris-HCl pH8.0 150mM NaCl, 1mM EDTA 0.02% NaN3. 透析24小时 透析时注意透析袋的截留分子量 下面的工作就简单了，因为复性的蛋白已经在生理缓冲液中，进行阴阳离子交换层析爱怎么整就怎么整它了。