辣根过氧化物酶(偶联级别)

辣根过氧化物酶（HRP）

差异。如以2,2’-联氮-双-[3-乙基苯并噻唑啉]-6-磺酸(ABTS)为氢供体，则只能保护20％的酶活性，而以邻联茴香胺(ODA)为氢供体时，酶活性的保护提高至90％。HRP之所以是迄今为止在ELISA中应用最为广泛的标记用酶，主要是因为其一方面易于提取，价格相对低廉；另一方面性质稳定，耐热及有机溶剂的作用，与抗原或抗体偶联后，活性很少受损失。

辣根过氧化物酶 horseradish peroxidase

缩写为FRP．为过氧化物酶之一种，含于辣根（ horseradish）中。 1941年 F· Thcorell曾提取其结晶。将之吸入细胞或注入之后，以 3， 3′ -二氨基联苯（ 3， 3′－ diaminobenzidine）为底物进行作用时，在光学或电子显微镜下可以看到一定的标记。最早为 W． Straus（ 1959）曾用以鉴别吞噬小体 Ph-agosome． K． Kristensson和 G． Olsson，（ 1974）在对利用轴突内逆行运输的神经元、轴突分支的着染，并而用于

HRP (辣根过氧化物酶) 标记抗体流程

1.         8 mg 辣根过氧化物酶放入1 ml玻璃瓶，加入1 ml双蒸水溶解，液体呈棕色。 2.         放入一个磁力搅拌子，电磁搅拌同时逐滴缓缓加入新配制的 NaIO4 0.2 ml，室温下继续搅拌40 min，液体呈现草绿色。 3.         将全部溶液用滴管装入反复用去离子水冲洗的透析袋中，4 oC 对1  mM pH 4.4的NaAc透析过夜，中间换液3－4次，每次300 ml，溶液最终呈浅棕色。 4.