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- 2025年09月05日
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pLenti-C19orf33-sgRNA (C19orf33基因敲除质粒)是一种在动物细胞中可以同时表达Cas9、目的基因的sgRNA和puromycin抗性基因的质粒。用于在动物细胞中直接基于CRISPR/Cas9技术敲除目的基因，或者通过包装慢病毒后基于CRISPR/Cas9技术敲除目的基因。本质粒中sgRNA的有效性已经通过T7EI法的验证。
本质粒在细菌中为Amp抗性，全长约13,000bp。本质粒的关键图谱信息请参考图1。本质粒可直接转染细胞用于目的基因的CRISPR/Cas9敲除，以及通过puromycin筛选稳定细胞株；也可以与pMDLg、Rev及VSV-g共转HEK293T细胞进行重组慢病毒(lentivirus)的包装，然后再用于感染细胞或组织并进行目的基因的CRISPR/Cas9敲除。
图1. 表达sgRNA、Cas9和puromycin抗性的pLenti-sgRNA质粒关键图谱信息。
本质粒中的sgRNA基于碧云天研发的CRISPR/Cas9 sgRNA快速筛选和验证体系获得，sgRNA的有效性已经通过T7EI法验证。
本质粒用于实验时，建议同时选购无任何靶向的对照质粒pLenti-Control-sgRNA (L00011)或靶向GFP的对照质粒pLenti-GFP-sgRNA (L00013)。
碧云天同时提供基于CRISPR/Cas9技术的C19orf33基因敲除的质粒(L12570 pLenti-C19orf33-sgRNA)、慢病毒(L12571 C19orf33 Knockout Lentivirus)、HEK293T细胞(L12572 C19orf33 Knockout HEK293T Cells)、HEK293T敲除细胞的RIPA裂解液(L12573 C19orf33 Knockout HEK293T RIPA Lysate)、HEK293T敲除细胞的Trizol裂解液(L12574 C19orf33 Knockout HEK293T Trizol Lysate)等产品，具体请在碧云天网站查询或在本产品网页点击相应产品。
C19orf33基因的基本信息如下：
| Species | Gene Symbol | Gene ID | GenBank Accession | Transcript |
| Human | C19orf33 | 64073 | BC060319 | NM_033520 |
| About the gene | |
| Official Symbol | C19orf33 |
| Previous Symbol | - |
| Official Full Name | chromosome 19 open reading frame 33 |
| Synonyms | IMUP-1; IMUP-2; H2RSP; IMUP |
| Location | 19q13.2 |
| Gene Type | protein-coding gene |
| Uniprot ID | Q9GZP8 |
| Pathway/Library | Lung Cancer Growth Related Genes Library |
| Gene Summary | The protein encoded by this gene has been shown to be upregulated in SV40-immortalized fibroblasts as well as in endometrial carcinoma cells. The encoded protein is found primarily in the nucleus. This protein may play a role in placental development and diseases such as pre-eclampsia. Two transcript variants encoding different isoforms have been found for this gene. |
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文献和实验了两种生物学复本在不同表达水平范围的表达稳定性。 这测定了该分析在不同表达水平的差异。为此，用管家基因板以及参照样品（siGFP处理的细胞）对（每个用siRNAs靶向BARD1、C19ORF24、GDF3或DONSON处理的样品的）两个复本进行标准化，以推导出各自的相对表达水平（图3）。在全部3个板之间进行分析（体现全部947次重复测定）。这些结果显示了变异系数在0.1-2.5倍表达的范围内非常稳定，大约为10%。 图2: 两个生物学重复之间的相关性。 该描记图显示（a）参照基因检测板，（b
对（如图2所示）。因此TALE是识别靶基因，而FokI是起了切割DNA的作用。 图2 TALEN质粒构建 3. TALEN的非同源重组/基因敲除 TALEN质粒对共转入细胞后，表达的融合蛋白即特异性地与靶DNA结合。而两个TALEN融合蛋白中的FokI核酸内切酶形成二聚体，发挥剪切活性，在两个靶位点之间打断目标基因（如图3所示），形成DSB（Double-Strand Breaks），诱发DNA损伤修复机制。细胞可通过非同源重组NHEJ
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