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![[试用装]慢病毒](https://img1.dxycdn.com/p/s14/2024/0228/381/8047520102688272671.jpg!wh200)
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慢病毒载体构建
慢病毒载体构建
汉恒服务项目
汉恒生物科技（上海）有限公司提供慢病毒载体构建，RNAi(shRNA)，miRNA，过表达和干扰慢病毒包装以及基于慢病毒技术的稳定细胞系构建服务。
整体实验流程
（一） 实验流程（1、2、3为并列步骤）
1.慢病毒过表达质粒载体的构建 设计上下游特异性扩增引物，同时引入酶切位点，PCR(采用高保真KOD酶，3K内突变率为0%)从模板中（CDNA质粒或者文库）调取目的基因CDS区（coding sequence）连入T载体。将CDS区从T载体上切下，装入慢病毒过表达质粒载体。
2.慢病毒干扰质粒载体的构建 合成siRNA对应的DNA颈环结构，退火后连入慢病毒干扰质粒载体。
3.miRNA载体构建从 Genomic 中调取基因相应的Mir 前体, 并在调取引物中引入酶切位点。
4. 慢病毒载体的包装与浓缩纯化 制备慢病毒穿梭质粒及其辅助包装原件载体质粒，三种质粒载体分别进行高纯度无内毒素抽提，共转染293T细胞，转染后6 h 更换为完全培养基，培养48和72h后，分别收集富含慢病毒颗粒的细胞上清液，病毒上清液通过超离心浓缩病毒。
(二)流程图
提供产品：
最后提供1ml 滴度＞10^8PFU/ml，并免费提供对应的慢病毒对照。
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文献和实验技术产业化研发的专业人士共同创立的新型科技企业，公司专注于向国内生命科学研究、生物技术产业研发及医学临床提供全方位现代实验技术服务 。 团队于2003年组建，立足于深厚的分子生物学背景和扎实的科研实验技术服务基础，立命于终身为祖国的科研工作者提供全方位实验技术服务，并孜孜不倦地打造出我们自己研发生产的、比国际一流品牌产品还过硬的科研产品民族品牌，为国家科学技术研究和人民身心健康事业添砖加瓦!经过几年来的不懈努力，公司已建立了涵盖分子遗传学、细胞生物学、蛋白组学、免疫学 、信号传导和神经
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