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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
40
- 细胞类型:
原代细胞
- 物种来源:
人/大鼠/小鼠/其他
- 细胞形态:
上皮样/成纤维样/淋巴
- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
5ml-500ml
本公司生产的细胞总量约为5×10^5个/瓶,细胞纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出25cm2培养瓶,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态,然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。

2、细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1500rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀细胞用12ml完全培养基重悬,然后按1:2比例进行分瓶传代,最后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)待细胞完全贴壁后,观察培养结果,之后进行换液培养或传代。


3、细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1500rpm离心5min;
3)用适量的冻存液(基础培养基:FBS:DMSO=5:4:1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。

4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中, 1500rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。


三.注意事项
1.培养基于4℃条件下可保存3-6个月;
2.在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作;
3.人肾癌成纤维细胞完全培养基只可用于科研。
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文献和实验的分枝尖端,形成帽状间充质,促进帽状间充质中的肾祖细胞增殖分化,形成聚集(Pre-tubular aggregate,PA)。随后,PA 和 UB 分别进行间充质-上皮细胞转化(Mesenchymal-epithelial transition, MET)和小管生成,进而形成肾单位【2】。目前广泛用于肾脏研究的人肾脏细胞系忽略了细胞外微环境,与在体的器官类型和整体特性仍存在较大差异,不能充分体现出肾脏的作用及其特点,而三维培养的肾类器官模型为肾脏的研究提供了新途径。人源多能干细胞衍生的肾脏类器官
786-O(人肾透明细胞腺癌细胞)培养指南 786-O源自一名58岁白人男性患者的原发性透明细胞癌。细胞具有微绒毛和桥粒,能在软琼脂内生长,可生成一种PTH样多肽(分子量6kD),与乳癌和肺癌中生成的肽相似。该细胞适用于3D细胞培养,也是一种合适的转染宿主。 形态特征与生长方式 贴壁生长,但贴壁较弱,消化时间偏短,一般在1-2分钟。消化过度会导致细胞状态差、碎片多甚至死亡,消化不足则细胞成片脱落,影响后续实验。 培养要点与注意事项 培养基选用1640添加10%胎牛
无血清培养的首选是AIM V培养基(SFM)。在开始进行新的细胞培养时,可以参考下表所列的条件: 细胞系 细胞类型 种 组织 推荐使用的培养基 293 成纤维细胞 人 胚胎肾 MEM, 10% 热灭活马血清 3T6 成纤维细胞 小鼠 胚胎 DMEM, 10% 胎牛血清 A549 上皮细胞 人 肺癌 F-12K, 10%胎牛血清 A9 成纤维细胞 小鼠 结缔组织 DMEM, 10%胎牛血清 AtT-20 上皮细胞 小鼠 垂体
技术资料暂无技术资料 索取技术资料










