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100 µg
蛋白名称:IgE蛋白, IgE protein
蛋白构建:A DNA sequence encoding the human IGHE (AAB59395.1) (Cys208-Lys427) was expressed with a polyhistidine tag at the C-terminus.
表达宿主:HEK293 Cells
蛋白纯度:> 95 % as determined by SDS-PAGE.
蛋白活性:0
蛋白内毒素:< 1.0 EU per μg protein as determined by the LAL method.
预测N端:Cys 208
蛋白分子量:The recombinant human IGHE consists of 231 amino acids and predicts a molecular mass of 26 kDa.
蛋白NP号:AAB59395.1
蛋白氨基酸序列:Cys208-Lys427
蛋白标签:C-His
蛋白保存条件:Store it under sterile conditions at -20℃ to -80℃. It is recommended that the protein be aliquoted for optimal storage. Avoid repeated freeze-thaw cycles.
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文献和实验或者互作蛋白复合物(红色+黄色)洗脱 Step 5:分析检测—Western Blot 或者质谱 常用“黑话” 以上示例图证明了 EDR1 和 EDR4 有相互作用。如果想要设计好实验,先清楚以下常用“黑话”含义。 阳性对照:证实细胞裂解物中确实存在靶蛋白(IP)或者互作蛋白对(co-IP,比如诱饵蛋白X和靶蛋白 Y),即为常说的 input。可直接取抽好的蛋白溶液进行 Western。 阴性对照:用来排除假阳性。IP/co-IP 后靶蛋白或者互作蛋白对都检测到了,固然是值得高兴
纯化最常用的方法之一,是亲和层析法,借助标签和配体的亲和力进行蛋白纯化。纯化的重组蛋白通常能以特异性的方式被洗脱,例如,在 Strep 标签蛋白纯化中,加入生物素(biotin)即可断开 Strep 标签与配体 Strep - Tactin 的作用,达到有效洗脱的目的。得到高纯度有活性的蛋白质应用在多种下游实验中,如研究蛋白质间相互作用等。 那么是否可以以此为基础,将标签配体亲和力加以利用,结合免疫识别特性,用温和的方法得到高纯度的目的细胞呢? 一、「画龙点睛」的表位标签—— Fab
及重链和轻链之间由二硫键连接,形成的构象与英文大写字母“Y”类似。根据重链的不同将Ig分为5个同种型(isotype),分别是IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。其中IgG、IgD和IgE只有单体形式,而IgA和IgM具有由数个相同单体组成的多聚体形式。 图2:抗体结构示意图 Ig轻链和重链中氨基酸序列变化较大的区域称为可变区(variable region, V),氨基酸序列较保守的区域称为恒定区(constant region, C)。重链和轻链可变区(VH和VL)各有3个区域的氨基酸组成
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