改良型TRAP染色试剂盒北京供应商

特别提示：包括改良型TRAP染色试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：改良型TRAP染色试剂盒
英文名称：Improved TRAP Staining Kit
产品货号：HR9064
产品规格：30mL|60mL

本染色液可用于新鲜血涂片、细胞涂片，亦可用于冰冻切片、石蜡切片。

酸性磷酸酶(acid phosphatase，ACP)分布极广泛，遍布各种组织，主要存在于细胞的溶酶体内，所以常作为溶酶体标志酶。溶酶体外的酸性磷酸酶存在于内质网和胞质内。各种动物中的酸性磷酸酶各有不同，酸性磷酸酶的适宜pH为4.5～5.5。存在于正常人肺泡巨噬细胞和白血病人脾脏的抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate-resistnt acid phosphatase，TRAP)均在细胞滤泡中，并不是释放入血液。血液中的TRAP绝大多数来源于破骨细胞，因此可以通过测量血液中的TRAP了解破骨细胞的功能状态。

抗酒石酸酸性磷酸酶染色液以萘酚AS-BI为底物，在酸性pH下被酸性磷酸酶水解释放出磷酸和萘酚，萘酚与重氮盐偶联生成有色产物，定位于细胞质中，若细胞内的ACP有抗酒石酸的活性，则呈阳性反应。

试剂盒组成：

组份		3×10mL	3×20mL
试剂A：TRAP固定液A		25mL	50mL
试剂B：TRAP孵育液	B1：AS-BI Buffer	2×0.5mL	4×0.5mL
	B2：GBC染色液	0.1mL	0.2mL
	B3：TRAP Buffer	9mL	18mL
试剂C：苏木素染色液		10mL	20mL

保存条件：2-8℃避光保存，有效期6个月。


使用注意事项：
1．TRAP孵育液易失效，本法宜用皮肤穿刺血涂片，晾干后应及时染色；
2．B2：GBC染色液尽量4℃保存，尽量避免-20℃，以免潮解；
3．对冰冻切片染色时，应减少切片在室温暴露的时间。
4．样本需新鲜，取材后应立即处理，否则会影响酶的活性。
5．组织固定需在4℃冰箱进行，时间不宜超过24h，否则酶活性会减弱或消失。
6．一般不建议用石蜡切片。如果需要用石蜡切片，组织在石蜡包埋时，温度不宜高于56℃。应使用熔点为52～54℃的石蜡进行浸蜡，浸蜡时间要短，否则酶活性会减弱或消失。

试剂的配置：
使用前，将B1：B2：B3=10:1:90混合，即为TRAP孵育液，现配现用。

使用方法：

一、血液、细胞涂片：
1.推片：取新鲜血液或骨髓涂片置于在玻片上，推玻片于载玻片保持30度，置于血液或细胞滴液的正前方，稍往后移与血液或细胞滴液接触使后者沿推片下缘散开，再匀速沿载玻片平面平稳向前滑动至铺满血膜为止；
2.自然晾干，TRAP固定液4℃固定30s～3min，多数情况下30～60s即可；
3.水洗，稍微晾干（不易过分干燥）；
4.切片入TRAP孵育液，置于37℃恒温箱，避光浸染45～60min，水洗；
5.复染：苏木素染色液染色3～5min；
6.水洗、晾干、镜检。

二、冰冻切片
1.冰冻切片回温至37℃，水中浸泡1～2min；
2.自然晾干，TRAP固定液4℃固定1～3min；
3.水洗，稍微晾干（不易过分干燥）；
4.切片入TRAP孵育液，置于37℃恒温箱，避光浸染45～60min，水洗；
5.复染：苏木素染色液染色5～8min；
6.水洗、晾干、镜检。

染色结果：

阳性颗粒	紫红色
细胞核	蓝色

毛细胞白血病的毛细胞ACP染色呈强阳性或中度阳性，且不被酒石酸抑制，其他细胞呈弱阴性或极弱阳性；
急性白血病幼单核细胞ACP染色呈阳性，原淋巴细胞呈弱阳性，原粒细胞对ACP反应不一；
T淋巴细胞ACP染色呈阳性，颗粒粗大，分布密集。B淋巴细胞呈阴性或颗粒细小的弱阳性；
戈谢细胞呈强阳性，尼曼-皮克细胞呈阴性或弱阳性。

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