- ¥360 - 1530
- geltinsa
- JLC-G7015
- 国内
- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
21
- 英文名：
BL21 Star(DE3)pLysSChemically Competent Cell
- 保质期：
12个月
- 供应商：
江西江蓝纯生物试剂有限公司
- 保存条件：
避光保存
- 规格：
10×100μl /50×100μl
| 规格： | 10×100μl | 产品价格： | ¥360.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 50×100μl | 产品价格： | ¥1530.0 |
BL21 Star(DE3)pLysSChemically Competent Cell
产品货号： JLC-G7015
保存条件： -80℃
产品规格：10×100μl 50×100μl
产品介绍：
基因型 :
F- ompT hsdSB(rB- mB- ) gal dcm rne131 (DE3)pLysS (CamR)
简单说明 :
BL21Star(DE3)pLysS 菌株来源于BL21(DE3)，含有 rne131 突变（RNaseE基因），RNaseE 基因的突变降低了內源RNase 的积累，增强菌株细胞内mRNA 的稳定性，从而提高异源蛋白的表达水平。-
主要适用于T7 启动子表达载体(如 pET系列)的高水平蛋白表达，同时含有大肠杆菌 RNA聚合酶，也可用于非T7 启动子表达载体（pGEX，pMAL等）的蛋白表达。由于 BL21 Star(DE3)菌株的异源基因基础表达水平较高，所以不适合毒性蛋白的表达。
BL21 Star(DE3)pLysS 菌株携带pLysS 质粒，具有氯霉素抗性。pLysS 含有表达 T7溶菌酶的基因，T7溶菌酶可以作用于大肠杆菌细胞壁上的肽聚糖溶解大肠杆菌，还可与 T7 RNA 聚合酶结合抑制其转录活性，进而降低目的基因的背景表达水平，但不干扰IPTG 诱导的表达。pLysS 质粒含有 p15A 复制起始子，可以和含有 pUC或 pBR322 等复制起始子的质粒兼容。Bio-BL21Star(DE3) pLysS感受态细胞由特殊工艺制作，pUC19质粒检测转化效率达107 cfu/μg DNA。
操作说明 :
1. Bio-BL21Star(DE3) pLysS感受态细胞从-80℃拿出，迅速插入冰中，5分钟后待菌块融化，加入目的质粒并用手拨打EP管底混匀，冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT 或 LB)，混匀后37℃， 200 rpm 复苏60 分钟。
4. 5000 rpm离心一分钟收菌，留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
注意事项 :
1. 感受态细胞在冰中缓慢融化，插入冰中8 分钟内加入目标DNA，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒可相应减少终用于涂板的菌量。
4. 诱导时，IPTG浓度可选（0.1-10 mM均可）。
5. 为获得需要量的蛋白，佳诱导时间，温度，IPTG浓度需实验者优化。
6. BL21 Star(DE3)pLysS 菌株携带 pLysS质粒，除复苏培养基为无抗生素外，其余所用培养基、培养液均应含有 34µg/ml 氯霉素，以防质粒丢失。
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文献和实验） 3：BL21(DE3) pLysS菌株 该菌株含有质粒pLysS，因此具有氯霉素抗性。PLysS含有表达T7溶菌酶的基因，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰目的蛋白的表达。该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。 基因型：F-，ompT hsdS（rBB-mB－），gal， dcm（DE3，pLysS ，Camr 4：JM109菌株 该菌株在使用pUC系列
【交流】转载：JM109，DH5a，BL21这些感受态有何区别
子的表达载体（如pET系列）的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于λ 噬菌体DE3区，该区整合于BL21的染色体上。该菌适合表达非毒性蛋白。 基因型：F-，ompT， hsdS（rBB-mB－），gal， dcm（DE3） 3：BL21(DE3) pLysS菌株 该菌株含有质粒pLysS，因此具有氯霉素抗性。PLysS含有表达T7溶菌酶的基因，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰目的蛋白的表达。该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。 基因型：F-，ompT hsdS（rBB-mB－
） 3：BL21(DE3) pLysS菌株 该菌株含有质粒pLysS，因此具有氯霉素抗性。PLysS含有表达T7溶菌酶的基因，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰目的蛋白的表达。该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。 基因型：F-，ompT hsdS（rBB-mB－），gal， dcm（DE3，pLysS ，Camr 4：JM109菌株 该菌株在使用pUC系列
